首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
JOURNAL OF CAPITAL UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2004年
2期
154-158
,共5页
祁雅慧%王雅梅%孙丽翠%司杨%闫豫东%张静宜%邴国英
祁雅慧%王雅梅%孫麗翠%司楊%閆豫東%張靜宜%邴國英
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人胰岛素样生长因子%基因克隆%基 因表达
人胰島素樣生長因子%基因剋隆%基 因錶達
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采用RT-PCR方法,从人扁桃体组织中扩增得到人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)cDNA,利用基因重组技术将该基因片段重组于pcDNA3.1(+)真核表达载体上,成功构建了pcDNA/I重组表达载体.应用脂质体介导的基因转移技术将重组质粒体外转染至人脐静脉内皮细胞(HUVEC).MTT法检测结果表明:重组质粒转染能明显促进内皮细胞的分裂增生.将重组质粒通过脂质体介导,体外转染至人肾细胞293细胞系进行表达,经G418筛选获得稳定表达的重组质粒细胞克隆,表达产物经鸡胚绒毛尿囊膜试验表明有促血管生成活性.此结果为研究IGF-1对血管内皮细胞作用的分子机制,以及利用IGF-1基因治疗肢体及冠状动脉缺血性疾病等的研究奠定了实验基础.
採用RT-PCR方法,從人扁桃體組織中擴增得到人胰島素樣生長因子-1(IGF-1)cDNA,利用基因重組技術將該基因片段重組于pcDNA3.1(+)真覈錶達載體上,成功構建瞭pcDNA/I重組錶達載體.應用脂質體介導的基因轉移技術將重組質粒體外轉染至人臍靜脈內皮細胞(HUVEC).MTT法檢測結果錶明:重組質粒轉染能明顯促進內皮細胞的分裂增生.將重組質粒通過脂質體介導,體外轉染至人腎細胞293細胞繫進行錶達,經G418篩選穫得穩定錶達的重組質粒細胞剋隆,錶達產物經鷄胚絨毛尿囊膜試驗錶明有促血管生成活性.此結果為研究IGF-1對血管內皮細胞作用的分子機製,以及利用IGF-1基因治療肢體及冠狀動脈缺血性疾病等的研究奠定瞭實驗基礎.
채용RT-PCR방법,종인편도체조직중확증득도인이도소양생장인자-1(IGF-1)cDNA,이용기인중조기술장해기인편단중조우pcDNA3.1(+)진핵표체재체상,성공구건료pcDNA/I중조표체재체.응용지질체개도적기인전이기술장중조질립체외전염지인제정맥내피세포(HUVEC).MTT법검측결과표명:중조질립전염능명현촉진내피세포적분렬증생.장중조질립통과지질체개도,체외전염지인신세포293세포계진행표체,경G418사선획득은정표체적중조질립세포극륭,표체산물경계배융모뇨낭막시험표명유촉혈관생성활성.차결과위연구IGF-1대혈관내피세포작용적분자궤제,이급이용IGF-1기인치료지체급관상동맥결혈성질병등적연구전정료실험기출.
