CAJ | 학술논문

背景与目的:近期研究发现磷脂酰肌醇激酶-3催化亚单位α基因(phosphatidylinositol 3-kinase catalytic alpha polypeptide gene,PIK3CA)在多种肿瘤中存在高频的体细胞突变,并且突变常发生在PIK3CA的第9外显子和20外显子两个热点突变区.对这两个热点突变的研究表明,这些突变能增强该酶的活性、有助于肿瘤细胞的侵袭、对抗凋亡等.因此提示PIK3CA基因是与多种肿瘤发生、发展相关的癌基因.本研究旨在检测鼻咽癌组织中PIK3CA两个热点突变区的突变,以及该基因的变异与鼻咽癌发病的关系.方法:在鼻咽癌组织及患者外周血中筛查PIK3CA的突变热点区第9外显子和第20外显子.对46例散发性鼻咽癌组织标本采用PCR产物克隆测序,对与之匹配的46例鼻咽癌患者外周血标本和3个鼻咽癌细胞系(CNE1,CNE2,SUNE1),则将PCR产物直接测序.结果:在46例鼻咽癌组织标本中在PIK3CA热点突变区第9号外显子检出2例突变(4.3%):1例为T1563G(521Asn→Lys);另1例为A1646G(549Asp→Gly).在46例鼻咽癌标本第9外显子中18例检出A1634C-G1658C-del 1659T"复合突变",进一步研究表明该"复合突变"可能为22号染色体上同源区域的序列.在对PIK3CA另外一个突变热点区第20外显子的检测中,46例鼻咽癌组织标本中都没检测到突变.另外,在3个鼻咽癌细胞系和46例鼻咽癌匹配外周血DNA标本用PCR-直接测序法均未检测到第9外显子和第20外显子突变.结论:PIK3CA基因第9外显子与第20外显子鼻咽癌中较少发生突变;克隆测序检测体细胞突变具有更高的敏感性,通过该方法在第9外显子发现的"复合突变"可能是22q11.2的Cat Eye Syndrome region高度同源区域的序列而非PIK3CA基因座的变异.
배경여목적:근기연구발현린지선기순격매-3최화아단위α기인(phosphatidylinositol 3-kinase catalytic alpha polypeptide gene,PIK3CA)재다충종류중존재고빈적체세포돌변,병차돌변상발생재PIK3CA적제9외현자화20외현자량개열점돌변구.대저량개열점돌변적연구표명,저사돌변능증강해매적활성、유조우종류세포적침습、대항조망등.인차제시PIK3CA기인시여다충종류발생、발전상관적암기인.본연구지재검측비인암조직중PIK3CA량개열점돌변구적돌변,이급해기인적변이여비인암발병적관계.방법:재비인암조직급환자외주혈중사사PIK3CA적돌변열점구제9외현자화제20외현자.대46례산발성비인암조직표본채용PCR산물극륭측서,대여지필배적46례비인암환자외주혈표본화3개비인암세포계(CNE1,CNE2,SUNE1),칙장PCR산물직접측서.결과:재46례비인암조직표본중재PIK3CA열점돌변구제9호외현자검출2례돌변(4.3%):1례위T1563G(521Asn→Lys);령1례위A1646G(549Asp→Gly).재46례비인암표본제9외현자중18례검출A1634C-G1658C-del 1659T"복합돌변",진일보연구표명해"복합돌변"가능위22호염색체상동원구역적서렬.재대PIK3CA령외일개돌변열점구제20외현자적검측중,46례비인암조직표본중도몰검측도돌변.령외,재3개비인암세포계화46례비인암필배외주혈DNA표본용PCR-직접측서법균미검측도제9외현자화제20외현자돌변.결론:PIK3CA기인제9외현자여제20외현자비인암중교소발생돌변;극륭측서검측체세포돌변구유경고적민감성,통과해방법재제9외현자발현적"복합돌변"가능시22q11.2적Cat Eye Syndrome region고도동원구역적서렬이비PIK3CA기인좌적변이.