现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2007年
5期
601-603
,共3页
葛伏林%王婧%周毅%梁洁%张燕齐%郭雪艳%丁杰
葛伏林%王婧%週毅%樑潔%張燕齊%郭雪豔%丁傑
갈복림%왕청%주의%량길%장연제%곽설염%정걸
多药耐药基因1%启动子%朊蛋白%胃肿瘤%荧光素酶报告基因
多藥耐藥基因1%啟動子%朊蛋白%胃腫瘤%熒光素酶報告基因
다약내약기인1%계동자%원단백%위종류%형광소매보고기인
目的:构建含MDR1基因启动子的荧光素酶报告基因质粒,并检测其在朊蛋白高表达胃癌细胞系中的活性表达.方法:PCR克隆人MDR1基因启动子片段,通过亚克隆将启动子分别插入到pMD18-T载体和荧光素酶报告基因pGL3-Enhancer载体中,建立含MDR1启动子的荧光素酶报告基因质粒pGL-MDR1,并经测序及酶切确定扩增序列;脂质体基因转染法将pGL-MDR1转染入朊蛋白高表达胃癌细胞系SGC7901-PrP,并测定其荧光素酶活性.结果:PCR克隆出MDR1启动子经DNA测序证实序列正确,pGL-MDR1转染入朊蛋白高表达胃癌细胞系的荧光素酶活性,较转染入pcDNA3.1空载体细胞系相比升高3～5倍.结论:成功构建含MDR1启动子的荧光素酶报告基因质粒;上调朊蛋白表达可激活MDR1的转录活性.
目的:構建含MDR1基因啟動子的熒光素酶報告基因質粒,併檢測其在朊蛋白高錶達胃癌細胞繫中的活性錶達.方法:PCR剋隆人MDR1基因啟動子片段,通過亞剋隆將啟動子分彆插入到pMD18-T載體和熒光素酶報告基因pGL3-Enhancer載體中,建立含MDR1啟動子的熒光素酶報告基因質粒pGL-MDR1,併經測序及酶切確定擴增序列;脂質體基因轉染法將pGL-MDR1轉染入朊蛋白高錶達胃癌細胞繫SGC7901-PrP,併測定其熒光素酶活性.結果:PCR剋隆齣MDR1啟動子經DNA測序證實序列正確,pGL-MDR1轉染入朊蛋白高錶達胃癌細胞繫的熒光素酶活性,較轉染入pcDNA3.1空載體細胞繫相比升高3～5倍.結論:成功構建含MDR1啟動子的熒光素酶報告基因質粒;上調朊蛋白錶達可激活MDR1的轉錄活性.
목적:구건함MDR1기인계동자적형광소매보고기인질립,병검측기재원단백고표체위암세포계중적활성표체.방법:PCR극륭인MDR1기인계동자편단,통과아극륭장계동자분별삽입도pMD18-T재체화형광소매보고기인pGL3-Enhancer재체중,건립함MDR1계동자적형광소매보고기인질립pGL-MDR1,병경측서급매절학정확증서렬;지질체기인전염법장pGL-MDR1전염입원단백고표체위암세포계SGC7901-PrP,병측정기형광소매활성.결과:PCR극륭출MDR1계동자경DNA측서증실서렬정학,pGL-MDR1전염입원단백고표체위암세포계적형광소매활성,교전염입pcDNA3.1공재체세포계상비승고3～5배.결론:성공구건함MDR1계동자적형광소매보고기인질립;상조원단백표체가격활MDR1적전록활성.
