厦门大学学报(自然科学版)
廈門大學學報(自然科學版)
하문대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY
2008年
z2期
1-5
,共5页
DNA提取%鸟类标本%线粒体DNA%白鹭%白鹳
DNA提取%鳥類標本%線粒體DNA%白鷺%白鸛
DNA제취%조류표본%선립체DNA%백로%백관
应用3种DNA提取方法(蛋白酶K法, Chelex 100法, 硅颗粒法),从馆藏湿地鸟类陈旧标本的羽毛、皮肤、骨骼组织中提取基因组DNA,经PCR扩增后对线粒体12S rDNA部分片段进行测序和Genbank查对,以探讨鸟类陈旧标本DNA的最佳提取方法和提取组织.结果表明,利用鸟类陈旧标本能够提取到基因组DNA.蛋白酶K法和硅颗粒法能够从白鹭(Egretta garzetta)标本的骨骼组织中提取到DNA并获得长度425 bp的线粒体12S rDNA序列(Genbank接收号AY766387),蛋白酶K法还能够从白鹳(Ciconia ciconia)标本的羽毛中获得长度263 bp的线粒体12S rDNA序列(Genbank接收号AY766388),Chelex 100法不能从鸟类标本中提取到DNA.蛋白酶K法的DNA提取量较大,但是步骤繁琐而导致DNA被污染的几率增大,因此,实验过程中要注意防止污染,且提取骨组织DNA要经过纯化.硅颗粒法的步骤简单,污染几率降低,提取骨骼组织DNA不需经过纯化,但是其DNA提取量较少,不能用于羽毛DNA的提取.因此,硅颗粒法是从鸟类陈旧标本骨骼组织提取DNA的理想方法,蛋白酶K法可用于鸟类陈旧标本羽毛的DNA提取.
應用3種DNA提取方法(蛋白酶K法, Chelex 100法, 硅顆粒法),從館藏濕地鳥類陳舊標本的羽毛、皮膚、骨骼組織中提取基因組DNA,經PCR擴增後對線粒體12S rDNA部分片段進行測序和Genbank查對,以探討鳥類陳舊標本DNA的最佳提取方法和提取組織.結果錶明,利用鳥類陳舊標本能夠提取到基因組DNA.蛋白酶K法和硅顆粒法能夠從白鷺(Egretta garzetta)標本的骨骼組織中提取到DNA併穫得長度425 bp的線粒體12S rDNA序列(Genbank接收號AY766387),蛋白酶K法還能夠從白鸛(Ciconia ciconia)標本的羽毛中穫得長度263 bp的線粒體12S rDNA序列(Genbank接收號AY766388),Chelex 100法不能從鳥類標本中提取到DNA.蛋白酶K法的DNA提取量較大,但是步驟繁瑣而導緻DNA被汙染的幾率增大,因此,實驗過程中要註意防止汙染,且提取骨組織DNA要經過純化.硅顆粒法的步驟簡單,汙染幾率降低,提取骨骼組織DNA不需經過純化,但是其DNA提取量較少,不能用于羽毛DNA的提取.因此,硅顆粒法是從鳥類陳舊標本骨骼組織提取DNA的理想方法,蛋白酶K法可用于鳥類陳舊標本羽毛的DNA提取.
응용3충DNA제취방법(단백매K법, Chelex 100법, 규과립법),종관장습지조류진구표본적우모、피부、골격조직중제취기인조DNA,경PCR확증후대선립체12S rDNA부분편단진행측서화Genbank사대,이탐토조류진구표본DNA적최가제취방법화제취조직.결과표명,이용조류진구표본능구제취도기인조DNA.단백매K법화규과립법능구종백로(Egretta garzetta)표본적골격조직중제취도DNA병획득장도425 bp적선립체12S rDNA서렬(Genbank접수호AY766387),단백매K법환능구종백관(Ciconia ciconia)표본적우모중획득장도263 bp적선립체12S rDNA서렬(Genbank접수호AY766388),Chelex 100법불능종조류표본중제취도DNA.단백매K법적DNA제취량교대,단시보취번쇄이도치DNA피오염적궤솔증대,인차,실험과정중요주의방지오염,차제취골조직DNA요경과순화.규과립법적보취간단,오염궤솔강저,제취골격조직DNA불수경과순화,단시기DNA제취량교소,불능용우우모DNA적제취.인차,규과립법시종조류진구표본골격조직제취DNA적이상방법,단백매K법가용우조류진구표본우모적DNA제취.
