中国真菌学杂志
中國真菌學雜誌
중국진균학잡지
CHINESE JOURNAL OF MYCOLOGY
2012年
3期
156-160
,共5页
徐赤宇%刘翠杰%吴建华%仇芸%赵瑾%朱红梅%温海
徐赤宇%劉翠傑%吳建華%仇蕓%趙瑾%硃紅梅%溫海
서적우%류취걸%오건화%구예%조근%주홍매%온해
新生隐球菌%RNA%真菌%液氮%Yeast RNA kit%酸洗玻璃珠法
新生隱毬菌%RNA%真菌%液氮%Yeast RNA kit%痠洗玻璃珠法
신생은구균%RNA%진균%액담%Yeast RNA kit%산세파리주법
目的 探讨快速获取高质量的新生隐球菌总RNA的实验方法.方法 选取新生隐球菌的荚膜株、荚膜缺陷株,分别设计采用4种方法提取总RNA:酸洗玻璃珠法、液氮研磨法、异硫氰酸胍一步法、冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法.用紫外线分光光度计测量其OD260、0D280的值,并且进行琼脂糖凝胶电泳,同时应用定量PCR法鉴定RNA质量.结果 酸洗玻璃珠法、液氮研磨法、异硫氰酸胍一步法、冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法的RNA产量分别为0.2μg/105细胞、0.4.μg/105细胞、0.1 μg/105细胞、0.6 μg/105细胞.结论 冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法提取的RNA均一性和完整性最好,是简便、快捷地提取具有荚膜和细胞壁双重屏障的新生隐球菌RNA的理想方法.
目的 探討快速穫取高質量的新生隱毬菌總RNA的實驗方法.方法 選取新生隱毬菌的莢膜株、莢膜缺陷株,分彆設計採用4種方法提取總RNA:痠洗玻璃珠法、液氮研磨法、異硫氰痠胍一步法、冷痠洗玻璃珠聯閤Yeast RNA kit法.用紫外線分光光度計測量其OD260、0D280的值,併且進行瓊脂糖凝膠電泳,同時應用定量PCR法鑒定RNA質量.結果 痠洗玻璃珠法、液氮研磨法、異硫氰痠胍一步法、冷痠洗玻璃珠聯閤Yeast RNA kit法的RNA產量分彆為0.2μg/105細胞、0.4.μg/105細胞、0.1 μg/105細胞、0.6 μg/105細胞.結論 冷痠洗玻璃珠聯閤Yeast RNA kit法提取的RNA均一性和完整性最好,是簡便、快捷地提取具有莢膜和細胞壁雙重屏障的新生隱毬菌RNA的理想方法.
목적 탐토쾌속획취고질량적신생은구균총RNA적실험방법.방법 선취신생은구균적협막주、협막결함주,분별설계채용4충방법제취총RNA:산세파리주법、액담연마법、이류청산고일보법、랭산세파리주연합Yeast RNA kit법.용자외선분광광도계측량기OD260、0D280적치,병차진행경지당응효전영,동시응용정량PCR법감정RNA질량.결과 산세파리주법、액담연마법、이류청산고일보법、랭산세파리주연합Yeast RNA kit법적RNA산량분별위0.2μg/105세포、0.4.μg/105세포、0.1 μg/105세포、0.6 μg/105세포.결론 랭산세파리주연합Yeast RNA kit법제취적RNA균일성화완정성최호,시간편、쾌첩지제취구유협막화세포벽쌍중병장적신생은구균RNA적이상방법.
