动物学报
動物學報
동물학보
ACTA ZOOLOGICA SINICA
2005年
1期
95-100
,共6页
鲤鱼%肥胖基因%Leptin%表达
鯉魚%肥胖基因%Leptin%錶達
리어%비반기인%Leptin%표체
为了研究鲤鱼肥胖基因的结构特点和体外表达产物的生物学活性,利用RT-PCR技术从鲤鱼肠系膜脂肪组织中扩增出鲤鱼肥胖基因的cDNA编码序列,分析表明该cDNA序列由438个核苷酸组成,编码146个氨基酸组成的多肽,鲤鱼肥胖基因与人、猪、鼠的相比,核苷酸同源性分别为:84%、86%、95%;氨基酸的同源性分别为84%、82%、96%.构建了原核表达载体pET-28a-li,利用IPTG在大肠杆菌中进行了诱导表达,并对表达产物进行了初步纯化和生物活性检测,结果表明,鲤鱼肥胖基因在大肠杆菌中进行了高效特异性融合表达,融合蛋白质分子量约为20 kD,经薄层扫描分析,目的蛋白占菌体总蛋白的20.3%.表达产物经过纯化和复性能够明显抑制小鼠的摄食和生长,说明表达产物Leptin具有明显的生物学活性[动物学报 51(1):95-100,2005].
為瞭研究鯉魚肥胖基因的結構特點和體外錶達產物的生物學活性,利用RT-PCR技術從鯉魚腸繫膜脂肪組織中擴增齣鯉魚肥胖基因的cDNA編碼序列,分析錶明該cDNA序列由438箇覈苷痠組成,編碼146箇氨基痠組成的多肽,鯉魚肥胖基因與人、豬、鼠的相比,覈苷痠同源性分彆為:84%、86%、95%;氨基痠的同源性分彆為84%、82%、96%.構建瞭原覈錶達載體pET-28a-li,利用IPTG在大腸桿菌中進行瞭誘導錶達,併對錶達產物進行瞭初步純化和生物活性檢測,結果錶明,鯉魚肥胖基因在大腸桿菌中進行瞭高效特異性融閤錶達,融閤蛋白質分子量約為20 kD,經薄層掃描分析,目的蛋白佔菌體總蛋白的20.3%.錶達產物經過純化和複性能夠明顯抑製小鼠的攝食和生長,說明錶達產物Leptin具有明顯的生物學活性[動物學報 51(1):95-100,2005].
위료연구리어비반기인적결구특점화체외표체산물적생물학활성,이용RT-PCR기술종리어장계막지방조직중확증출리어비반기인적cDNA편마서렬,분석표명해cDNA서렬유438개핵감산조성,편마146개안기산조성적다태,리어비반기인여인、저、서적상비,핵감산동원성분별위:84%、86%、95%;안기산적동원성분별위84%、82%、96%.구건료원핵표체재체pET-28a-li,이용IPTG재대장간균중진행료유도표체,병대표체산물진행료초보순화화생물활성검측,결과표명,리어비반기인재대장간균중진행료고효특이성융합표체,융합단백질분자량약위20 kD,경박층소묘분석,목적단백점균체총단백적20.3%.표체산물경과순화화복성능구명현억제소서적섭식화생장,설명표체산물Leptin구유명현적생물학활성[동물학보 51(1):95-100,2005].
