医学研究生学报
醫學研究生學報
의학연구생학보
JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATE
2010年
12期
1236-1239
,共4页
高血压%降血压肽%降血压肽前体%表达
高血壓%降血壓肽%降血壓肽前體%錶達
고혈압%강혈압태%강혈압태전체%표체
目的 降血压肽(antihypertensive peptide, AP)是一类能降低人体血压的小分子肽,是血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin convering enzyme inhibitor, ACEI),可通过抑制体内血管紧张素Ⅱ的生成达到降低血压的目的 .AP通常含有少数几个氨基酸残基,难以直接表达,因此文中设计含多种降压活性肽段的AP前体(antihypertensive peptide precursor, APP),构建原核表达载体,并在所构建的基因工程菌进行表达. 方法 筛选多种已报道的具有高体内降压活性的AP,经胃肠消化酶酶切位点串联成APP.基于大肠埃希菌偏爱密码子,人工合成相应的多肽基因(app),PCR扩增,克隆至表达载体pET-22b,转化E.coli BL21感受态细胞.重组质粒经双酶切和DNA测序鉴定,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(sopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)诱导表达重组APP. 结果 APP基因正确克隆至表达载体pET-22b中.诱导表达产物经SDS-PAGE分析,显示在相对分子质量11000处出现条带,与预期的重组APP大小相符. 结论 人工设计的APP在大肠埃希菌中获得成功表达,为AP的工业化制备打下基础.
目的 降血壓肽(antihypertensive peptide, AP)是一類能降低人體血壓的小分子肽,是血管緊張素轉換酶抑製劑(angiotensin convering enzyme inhibitor, ACEI),可通過抑製體內血管緊張素Ⅱ的生成達到降低血壓的目的 .AP通常含有少數幾箇氨基痠殘基,難以直接錶達,因此文中設計含多種降壓活性肽段的AP前體(antihypertensive peptide precursor, APP),構建原覈錶達載體,併在所構建的基因工程菌進行錶達. 方法 篩選多種已報道的具有高體內降壓活性的AP,經胃腸消化酶酶切位點串聯成APP.基于大腸埃希菌偏愛密碼子,人工閤成相應的多肽基因(app),PCR擴增,剋隆至錶達載體pET-22b,轉化E.coli BL21感受態細胞.重組質粒經雙酶切和DNA測序鑒定,併用異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(sopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)誘導錶達重組APP. 結果 APP基因正確剋隆至錶達載體pET-22b中.誘導錶達產物經SDS-PAGE分析,顯示在相對分子質量11000處齣現條帶,與預期的重組APP大小相符. 結論 人工設計的APP在大腸埃希菌中穫得成功錶達,為AP的工業化製備打下基礎.
목적 강혈압태(antihypertensive peptide, AP)시일류능강저인체혈압적소분자태,시혈관긴장소전환매억제제(angiotensin convering enzyme inhibitor, ACEI),가통과억제체내혈관긴장소Ⅱ적생성체도강저혈압적목적 .AP통상함유소수궤개안기산잔기,난이직접표체,인차문중설계함다충강압활성태단적AP전체(antihypertensive peptide precursor, APP),구건원핵표체재체,병재소구건적기인공정균진행표체. 방법 사선다충이보도적구유고체내강압활성적AP,경위장소화매매절위점천련성APP.기우대장애희균편애밀마자,인공합성상응적다태기인(app),PCR확증,극륭지표체재체pET-22b,전화E.coli BL21감수태세포.중조질립경쌍매절화DNA측서감정,병용이병기-β-D-류대반유당감(sopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)유도표체중조APP. 결과 APP기인정학극륭지표체재체pET-22b중.유도표체산물경SDS-PAGE분석,현시재상대분자질량11000처출현조대,여예기적중조APP대소상부. 결론 인공설계적APP재대장애희균중획득성공표체,위AP적공업화제비타하기출.
