CAJ | 학술논문

栽培马铃薯是高度杂合的四倍体作物,利用传统的基因克隆方式进行晚疫病抗性基因分离难度很大.然而,晚疫病抗性基因具有序列保守性,属于NBS-LRR类基因.本研究中,根据晚疫病抗性基因R3a家族的序列比对结果设计R3a基因家族的保守探针,并将含有R3a基因的BAC SH23G23部分酶切成7～11kb DNA片段.通过结合保守探针的磁珠系统对上述7～11 kb DNA片段进行R3a基因分离,将磁珠富集的片段克隆到双元载体pBINPLUS上.通过阳性克隆和菌落PCR鉴定表明,含有R3a基因的克隆比率达到82.76%,相对于磁珠系统富集前,提高R3a基因比率近19倍.本研究建立了抗病基因及其同源序列的磁珠分离系统,为分离马铃薯等多倍体作物中具有保守结构的基因提供了实验基础.
재배마령서시고도잡합적사배체작물,이용전통적기인극륭방식진행만역병항성기인분리난도흔대.연이,만역병항성기인구유서렬보수성,속우NBS-LRR류기인.본연구중,근거만역병항성기인R3a가족적서렬비대결과설계R3a기인가족적보수탐침,병장함유R3a기인적BAC SH23G23부분매절성7～11kb DNA편단.통과결합보수탐침적자주계통대상술7～11 kb DNA편단진행R3a기인분리,장자주부집적편단극륭도쌍원재체pBINPLUS상.통과양성극륭화균락PCR감정표명,함유R3a기인적극륭비솔체도82.76%,상대우자주계통부집전,제고R3a기인비솔근19배.본연구건립료항병기인급기동원서렬적자주분리계통,위분리마령서등다배체작물중구유보수결구적기인제공료실험기출.