实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2009年
3期
216-219
,共4页
周艳%陈吉庆%陆超%周国平%袁传顺%管亚飞
週豔%陳吉慶%陸超%週國平%袁傳順%管亞飛
주염%진길경%륙초%주국평%원전순%관아비
人骨髓间充质干细胞%靶向抑制%Par-4基因%凋亡%CD2相关蛋白
人骨髓間充質榦細胞%靶嚮抑製%Par-4基因%凋亡%CD2相關蛋白
인골수간충질간세포%파향억제%Par-4기인%조망%CD2상관단백
目的 研究小RNA干扰靶向抑制Par-4基因表达对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)中CD2相关蛋白(CD2AP)表达的影响及意义.方法 利用构建靶向抑制Par-4基因的SiRNA真核表达载体转染hBMSCs.采用实时荧光定量PCR检测Par-4基因的mRNA水平.采用谷氨酸诱导hBMSCs凋亡.采用流式细胞术检测hBMSCs凋亡百分率.Western blot检测hBMSCs CD2AP蛋白表达量.应用SPSS 10.0软件进行统计学分析.结果 1.Par-4-SiRNA可下调hBMSCs Par-4-mRNA水平,抑制率为88%(P＜0.01).而非抑制的对照序列未见抑制作用(P＞0.05).2.流式细胞术检测结果 显示,与正常对照组比较,谷氨酸加常规hBMSCs组凋亡百分率为(59.12±5.43)%(P＜0.01).而在Par-4-SiRNA转染的Par-4-SiRNA-hBMSCs组中,谷氨酸对hBMSCs的凋亡诱导作用被显著抑制,凋亡百分率显著下调为(39.49±5.01)%(P＜0.01).3.Par-4-SiRNA转染的Par-4-SiRNA-hBMSCs组,谷氨酸对hBMSCs中CD2AP的下调作用被显著抑制,CD2AP蛋白的表达量显著上升(P＜0.01).结论 靶向抑制Par-4基因的表达能够拮抗谷氨酸诱导的hBMSCs凋亡及CD2AP表达的下调.
目的 研究小RNA榦擾靶嚮抑製Par-4基因錶達對人骨髓間充質榦細胞(hBMSCs)中CD2相關蛋白(CD2AP)錶達的影響及意義.方法 利用構建靶嚮抑製Par-4基因的SiRNA真覈錶達載體轉染hBMSCs.採用實時熒光定量PCR檢測Par-4基因的mRNA水平.採用穀氨痠誘導hBMSCs凋亡.採用流式細胞術檢測hBMSCs凋亡百分率.Western blot檢測hBMSCs CD2AP蛋白錶達量.應用SPSS 10.0軟件進行統計學分析.結果 1.Par-4-SiRNA可下調hBMSCs Par-4-mRNA水平,抑製率為88%(P＜0.01).而非抑製的對照序列未見抑製作用(P＞0.05).2.流式細胞術檢測結果 顯示,與正常對照組比較,穀氨痠加常規hBMSCs組凋亡百分率為(59.12±5.43)%(P＜0.01).而在Par-4-SiRNA轉染的Par-4-SiRNA-hBMSCs組中,穀氨痠對hBMSCs的凋亡誘導作用被顯著抑製,凋亡百分率顯著下調為(39.49±5.01)%(P＜0.01).3.Par-4-SiRNA轉染的Par-4-SiRNA-hBMSCs組,穀氨痠對hBMSCs中CD2AP的下調作用被顯著抑製,CD2AP蛋白的錶達量顯著上升(P＜0.01).結論 靶嚮抑製Par-4基因的錶達能夠拮抗穀氨痠誘導的hBMSCs凋亡及CD2AP錶達的下調.
목적 연구소RNA간우파향억제Par-4기인표체대인골수간충질간세포(hBMSCs)중CD2상관단백(CD2AP)표체적영향급의의.방법 이용구건파향억제Par-4기인적SiRNA진핵표체재체전염hBMSCs.채용실시형광정량PCR검측Par-4기인적mRNA수평.채용곡안산유도hBMSCs조망.채용류식세포술검측hBMSCs조망백분솔.Western blot검측hBMSCs CD2AP단백표체량.응용SPSS 10.0연건진행통계학분석.결과 1.Par-4-SiRNA가하조hBMSCs Par-4-mRNA수평,억제솔위88%(P＜0.01).이비억제적대조서렬미견억제작용(P＞0.05).2.류식세포술검측결과 현시,여정상대조조비교,곡안산가상규hBMSCs조조망백분솔위(59.12±5.43)%(P＜0.01).이재Par-4-SiRNA전염적Par-4-SiRNA-hBMSCs조중,곡안산대hBMSCs적조망유도작용피현저억제,조망백분솔현저하조위(39.49±5.01)%(P＜0.01).3.Par-4-SiRNA전염적Par-4-SiRNA-hBMSCs조,곡안산대hBMSCs중CD2AP적하조작용피현저억제,CD2AP단백적표체량현저상승(P＜0.01).결론 파향억제Par-4기인적표체능구길항곡안산유도적hBMSCs조망급CD2AP표체적하조.
