河北医学
河北醫學
하북의학
HEBEI MEDICINE
2011年
12期
1654-1657
,共4页
胰岛%原代培养%糖尿病%药物筛选%模型
胰島%原代培養%糖尿病%藥物篩選%模型
이도%원대배양%당뇨병%약물사선%모형
目的:用胰岛细胞作为糖尿病新药的细胞筛选模型需保持其结构完整、生理功能稳定和足够长的存活时间,为此本文对小鼠胰岛分离纯化和培养方法进行优化.方法:用胶原酶、透明质酸酶和DNA酶消化,Ficoll 400密度梯度离心法分离胰岛；DTZ染色法和台盼兰染色测定胰岛的纯度和活力;放射免疫方法检测胰岛分泌水平变化.结果:0.1％胶原酶/0.1％透明质酸酶/0.1％ DNase-I(v/v)为4:2:0.5的消化酶体系,采用4℃和37C两步消化法可得到较高纯度和活力的胰岛；用聚赖氨酸作培养基质能稳定地维持胰岛分泌功能,且相对成本低廉.原代小鼠可以体外存活6周,维持稳定分泌功能10d.结论:采用上述消化、培养方法,原代小鼠胰岛能保持完整的结构并能在较长的时间维持其胰岛素分泌功能.
目的:用胰島細胞作為糖尿病新藥的細胞篩選模型需保持其結構完整、生理功能穩定和足夠長的存活時間,為此本文對小鼠胰島分離純化和培養方法進行優化.方法:用膠原酶、透明質痠酶和DNA酶消化,Ficoll 400密度梯度離心法分離胰島；DTZ染色法和檯盼蘭染色測定胰島的純度和活力;放射免疫方法檢測胰島分泌水平變化.結果:0.1％膠原酶/0.1％透明質痠酶/0.1％ DNase-I(v/v)為4:2:0.5的消化酶體繫,採用4℃和37C兩步消化法可得到較高純度和活力的胰島；用聚賴氨痠作培養基質能穩定地維持胰島分泌功能,且相對成本低廉.原代小鼠可以體外存活6週,維持穩定分泌功能10d.結論:採用上述消化、培養方法,原代小鼠胰島能保持完整的結構併能在較長的時間維持其胰島素分泌功能.
목적:용이도세포작위당뇨병신약적세포사선모형수보지기결구완정、생리공능은정화족구장적존활시간,위차본문대소서이도분리순화화배양방법진행우화.방법:용효원매、투명질산매화DNA매소화,Ficoll 400밀도제도리심법분리이도；DTZ염색법화태반란염색측정이도적순도화활력;방사면역방법검측이도분비수평변화.결과:0.1％효원매/0.1％투명질산매/0.1％ DNase-I(v/v)위4:2:0.5적소화매체계,채용4℃화37C량보소화법가득도교고순도화활력적이도；용취뢰안산작배양기질능은정지유지이도분비공능,차상대성본저렴.원대소서가이체외존활6주,유지은정분비공능10d.결론:채용상술소화、배양방법,원대소서이도능보지완정적결구병능재교장적시간유지기이도소분비공능.
