中国皮肤性病学杂志
中國皮膚性病學雜誌
중국피부성병학잡지
THE CHINESE JOURNAL OF DERMATOVENEREOLOGY
2011年
6期
426-429
,共4页
杜昆%余平%魏运梅%郑群
杜昆%餘平%魏運梅%鄭群
두곤%여평%위운매%정군
沙眼衣原体%CT703%原核表达%免疫原性
沙眼衣原體%CT703%原覈錶達%免疫原性
사안의원체%CT703%원핵표체%면역원성
目的 构建沙眼衣原体CT703原核表达质粒pGEX/CTT03,在大肠杆菌BL21中表达CT703蛋白,并鉴定其免疫原性.方法 从沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)12血清型基因组中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出全长CT703基因,亚克隆到原核表达栽体pGEX中.重组质粒经酶切和测序鉴定后,转化到E.coli BL21感受态细胞中,IPTG诱导融合蛋白表达.融合蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,ELISA和Western blot实验检测CT703蛋白的免疫原性及免疫反应性.结果 经酶切和测序鉴定,成功构建了原核重组表达质粒pGEX/CT703,,IPTG诱导后,表达出相对分子量81kD的融合蛋白,Westemblot检测免疫小鼠血清能与CT703蛋白特异性结合,ELISA检测免疫小鼠的血清效价为1:32 000.结论 CT703蛋白在大肠杆菌BL21中能有效表达,并具有较好的免疫原性.
目的 構建沙眼衣原體CT703原覈錶達質粒pGEX/CTT03,在大腸桿菌BL21中錶達CT703蛋白,併鑒定其免疫原性.方法 從沙眼衣原體(chlamydia trachomatis,CT)12血清型基因組中提取總RNA,用RT-PCR方法擴增齣全長CT703基因,亞剋隆到原覈錶達栽體pGEX中.重組質粒經酶切和測序鑒定後,轉化到E.coli BL21感受態細胞中,IPTG誘導融閤蛋白錶達.融閤蛋白純化後免疫BALB/c小鼠,ELISA和Western blot實驗檢測CT703蛋白的免疫原性及免疫反應性.結果 經酶切和測序鑒定,成功構建瞭原覈重組錶達質粒pGEX/CT703,,IPTG誘導後,錶達齣相對分子量81kD的融閤蛋白,Westemblot檢測免疫小鼠血清能與CT703蛋白特異性結閤,ELISA檢測免疫小鼠的血清效價為1:32 000.結論 CT703蛋白在大腸桿菌BL21中能有效錶達,併具有較好的免疫原性.
목적 구건사안의원체CT703원핵표체질립pGEX/CTT03,재대장간균BL21중표체CT703단백,병감정기면역원성.방법 종사안의원체(chlamydia trachomatis,CT)12혈청형기인조중제취총RNA,용RT-PCR방법확증출전장CT703기인,아극륭도원핵표체재체pGEX중.중조질립경매절화측서감정후,전화도E.coli BL21감수태세포중,IPTG유도융합단백표체.융합단백순화후면역BALB/c소서,ELISA화Western blot실험검측CT703단백적면역원성급면역반응성.결과 경매절화측서감정,성공구건료원핵중조표체질립pGEX/CT703,,IPTG유도후,표체출상대분자량81kD적융합단백,Westemblot검측면역소서혈청능여CT703단백특이성결합,ELISA검측면역소서적혈청효개위1:32 000.결론 CT703단백재대장간균BL21중능유효표체,병구유교호적면역원성.
