河南农业大学学报
河南農業大學學報
하남농업대학학보
ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS HENANENSIS
2010年
6期
644-648
,共5页
张朵%袁金玲%顾小平%郭广平%茹广欣
張朵%袁金玲%顧小平%郭廣平%茹廣訢
장타%원금령%고소평%곽엄평%여엄흔
筇竹%SSR%体系优化
笻竹%SSR%體繫優化
공죽%SSR%체계우화
为建立高效的筇竹SSR反应体系,以筇竹新鲜幼嫩叶片提取的基因组DNA为模板,研究了影响SSR反应效果的因素,包括Taq酶、Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA浓度等,建立了适合筇竹SSR反应的PCR体系,即20 μL反应体系中含有Taq酶0.8 U,Mg2+为1.5 mmol·L-1,dNTP 0.2 mmol·L-1,引物 0.25 μmol·L-1,模板DNA 60 ng.扩增程序为:94 ℃ 3 min,然后94 ℃ 40 s,52 ℃ 30 s,72 ℃ 45 s,30 个循环,72 ℃延伸5 min,4 ℃保存.
為建立高效的笻竹SSR反應體繫,以笻竹新鮮幼嫩葉片提取的基因組DNA為模闆,研究瞭影響SSR反應效果的因素,包括Taq酶、Mg2+、dNTPs、引物、模闆DNA濃度等,建立瞭適閤笻竹SSR反應的PCR體繫,即20 μL反應體繫中含有Taq酶0.8 U,Mg2+為1.5 mmol·L-1,dNTP 0.2 mmol·L-1,引物 0.25 μmol·L-1,模闆DNA 60 ng.擴增程序為:94 ℃ 3 min,然後94 ℃ 40 s,52 ℃ 30 s,72 ℃ 45 s,30 箇循環,72 ℃延伸5 min,4 ℃保存.
위건립고효적공죽SSR반응체계,이공죽신선유눈협편제취적기인조DNA위모판,연구료영향SSR반응효과적인소,포괄Taq매、Mg2+、dNTPs、인물、모판DNA농도등,건립료괄합공죽SSR반응적PCR체계,즉20 μL반응체계중함유Taq매0.8 U,Mg2+위1.5 mmol·L-1,dNTP 0.2 mmol·L-1,인물 0.25 μmol·L-1,모판DNA 60 ng.확증정서위:94 ℃ 3 min,연후94 ℃ 40 s,52 ℃ 30 s,72 ℃ 45 s,30 개순배,72 ℃연신5 min,4 ℃보존.
