工业微生物
工業微生物
공업미생물
INDUSTRIAL MICROBIOLOGY
2010年
6期
60-64
,共5页
王月宏%段作营%邵蔚蓝%李华钟
王月宏%段作營%邵蔚藍%李華鐘
왕월굉%단작영%소위람%리화종
嗜热厌氧乙醇杆菌%α-葡萄糖苷酶%重组表达%酶学性质
嗜熱厭氧乙醇桿菌%α-葡萄糖苷酶%重組錶達%酶學性質
기열염양을순간균%α-포도당감매%중조표체%매학성질
用PCR方法从嗜热厌氧乙醇杆菌(Thermoanaerobacter ethanolicus)JW200中扩增出编码α-葡萄糖苷酶的基因,将其克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pTrc99A上并获得表达α-葡萄糖苷酶的大肠杆菌重组菌.重组菌经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测出蛋白相对分子量约89 kDa,经阴离子交换层析和凝胶层析纯化后的α-葡萄糖苷酶最适反应温度为70 ℃,最适反应pH为5～5.5,且在pH 5.5～6.5之间有较高的稳定性.重组α-葡萄糖苷酶在70 ℃下105 min后酶活仍达到80%.
用PCR方法從嗜熱厭氧乙醇桿菌(Thermoanaerobacter ethanolicus)JW200中擴增齣編碼α-葡萄糖苷酶的基因,將其剋隆到大腸桿菌(Escherichia coli)錶達載體pTrc99A上併穫得錶達α-葡萄糖苷酶的大腸桿菌重組菌.重組菌經IPTG誘導錶達,SDS-PAGE檢測齣蛋白相對分子量約89 kDa,經陰離子交換層析和凝膠層析純化後的α-葡萄糖苷酶最適反應溫度為70 ℃,最適反應pH為5～5.5,且在pH 5.5～6.5之間有較高的穩定性.重組α-葡萄糖苷酶在70 ℃下105 min後酶活仍達到80%.
용PCR방법종기열염양을순간균(Thermoanaerobacter ethanolicus)JW200중확증출편마α-포도당감매적기인,장기극륭도대장간균(Escherichia coli)표체재체pTrc99A상병획득표체α-포도당감매적대장간균중조균.중조균경IPTG유도표체,SDS-PAGE검측출단백상대분자량약89 kDa,경음리자교환층석화응효층석순화후적α-포도당감매최괄반응온도위70 ℃,최괄반응pH위5～5.5,차재pH 5.5～6.5지간유교고적은정성.중조α-포도당감매재70 ℃하105 min후매활잉체도80%.
