分子诊断与治疗杂志
分子診斷與治療雜誌
분자진단여치료잡지
JOURNAL OF MOLECULAR DIAGNOSIS AND THERAPY
2010年
2期
115-118
,共4页
李茜%韩曼丽%杨学文%高峰%詹瑧
李茜%韓曼麗%楊學文%高峰%詹瑧
리천%한만려%양학문%고봉%첨진
实时荧光定量PCR%血管内皮生长因子%大鼠
實時熒光定量PCR%血管內皮生長因子%大鼠
실시형광정량PCR%혈관내피생장인자%대서
目的 建立大鼠血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)实时荧光定量PCR检测方法,对健康大鼠不同组织中VEGF mRNA水平进行检测分析.方法 跨内含子设计引物和TaqMan探针,扩增片段TA克隆人pGEM-T载体,制成标准品,分析其特异性、灵敏性和重复性;提取健康大鼠不同部位组织(肺、心、肝脏、肾脏、脑、胃、肠和颌下腺)总RNA,分析其VEGFmRNA表达水平.结果 测序及电泳条带证实PCR反应的特异性.批内CV为2.0%～6.7%,批间CV值为3.5%～10.6%,r>0.99;肺组织中VEGF mRNA表达最高,与其他任意组相比差异均具有统计学意义(P<0.05),其它各组织间差异无统计学意义.结论 本研究成功建立了检测大鼠VEGFmRNA的实时荧光定量PCR方法,具有高灵敏、高特异、高重复性的特点;健康大鼠不同部位组织中VEGFmRNA的表达水平分析为以后研究疾病大鼠模型表达水平奠定了基础.
目的 建立大鼠血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)實時熒光定量PCR檢測方法,對健康大鼠不同組織中VEGF mRNA水平進行檢測分析.方法 跨內含子設計引物和TaqMan探針,擴增片段TA剋隆人pGEM-T載體,製成標準品,分析其特異性、靈敏性和重複性;提取健康大鼠不同部位組織(肺、心、肝髒、腎髒、腦、胃、腸和頜下腺)總RNA,分析其VEGFmRNA錶達水平.結果 測序及電泳條帶證實PCR反應的特異性.批內CV為2.0%～6.7%,批間CV值為3.5%～10.6%,r>0.99;肺組織中VEGF mRNA錶達最高,與其他任意組相比差異均具有統計學意義(P<0.05),其它各組織間差異無統計學意義.結論 本研究成功建立瞭檢測大鼠VEGFmRNA的實時熒光定量PCR方法,具有高靈敏、高特異、高重複性的特點;健康大鼠不同部位組織中VEGFmRNA的錶達水平分析為以後研究疾病大鼠模型錶達水平奠定瞭基礎.
목적 건립대서혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor,VEGF)실시형광정량PCR검측방법,대건강대서불동조직중VEGF mRNA수평진행검측분석.방법 과내함자설계인물화TaqMan탐침,확증편단TA극륭인pGEM-T재체,제성표준품,분석기특이성、령민성화중복성;제취건강대서불동부위조직(폐、심、간장、신장、뇌、위、장화합하선)총RNA,분석기VEGFmRNA표체수평.결과 측서급전영조대증실PCR반응적특이성.비내CV위2.0%～6.7%,비간CV치위3.5%～10.6%,r>0.99;폐조직중VEGF mRNA표체최고,여기타임의조상비차이균구유통계학의의(P<0.05),기타각조직간차이무통계학의의.결론 본연구성공건립료검측대서VEGFmRNA적실시형광정량PCR방법,구유고령민、고특이、고중복성적특점;건강대서불동부위조직중VEGFmRNA적표체수평분석위이후연구질병대서모형표체수평전정료기출.
