CAJ | 학술논문

背景:前期实验已经证实30%心肌培养上清是诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的最佳浓度.目的:在前期实验基础上,观察30%心肌培养上清条件下诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的时间依赖效应.设计、时间及地点:对比观察,于2007-08/2008-06在徐州市心血管病研究所完成.材料:健康成年SD大鼠,体质鼍180～220 g.方法:分离大鼠骨髓间充质干细胞和心肌细胞并在体外培养纯化.以1×108L-1的细胞密度种植心肌细胞,培养72 h后收集上清.将骨髓间充质干细胞的DMEM/F12培养基换为含有30%M199心肌细胞培养上清作为实验组,对照组仍将细胞接种在DMEM/F12培养基上继续培养.主要观察指标:30%心肌细胞培养上清诱导7,14,21d后,应用免疫细胞化学技术检测骨髓间充质干细胞中α-平滑肌肌动蛋白、β-肌动蛋白和心肌特异性肌钙蛋白T的表达.结果:30%心肌细胞培养上清诱导骨髓间充质干细胞后,细胞的形态没有改变,但与对照组相比,α-平滑肌肌动蛋白、β肌动蛋白和心肌特异性肌钙蛋白T的表达均呈阳性,其中以第14天的蛋白表达量最高(P＜0.01).结论:30%心肌细胞培养上清诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的最佳诱导时间是14 d.
배경:전기실험이경증실30%심기배양상청시유도대서골수간충질간세포분화위심기양세포적최가농도.목적:재전기실험기출상,관찰30%심기배양상청조건하유도골수간충질간세포분화위심기양세포적시간의뢰효응.설계、시간급지점:대비관찰,우2007-08/2008-06재서주시심혈관병연구소완성.재료:건강성년SD대서,체질타180～220 g.방법:분리대서골수간충질간세포화심기세포병재체외배양순화.이1×108L-1적세포밀도충식심기세포,배양72 h후수집상청.장골수간충질간세포적DMEM/F12배양기환위함유30%M199심기세포배양상청작위실험조,대조조잉장세포접충재DMEM/F12배양기상계속배양.주요관찰지표:30%심기세포배양상청유도7,14,21d후,응용면역세포화학기술검측골수간충질간세포중α-평활기기동단백、β-기동단백화심기특이성기개단백T적표체.결과:30%심기세포배양상청유도골수간충질간세포후,세포적형태몰유개변,단여대조조상비,α-평활기기동단백、β기동단백화심기특이성기개단백T적표체균정양성,기중이제14천적단백표체량최고(P＜0.01).결론:30%심기세포배양상청유도골수간충질간세포분화위심기양세포적최가유도시간시14 d.