生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年
12期
2049-2055
,共7页
易天红%洪岸%谢珊珊%张玲%谢秋玲%戴云%余榕捷
易天紅%洪岸%謝珊珊%張玲%謝鞦玲%戴雲%餘榕捷
역천홍%홍안%사산산%장령%사추령%대운%여용첩
重组Maxadilan%基因合成%内含肽%纯化与鉴定
重組Maxadilan%基因閤成%內含肽%純化與鑒定
중조Maxadilan%기인합성%내함태%순화여감정
为利用基因工程技术获得重组Maxadilan(RMMAX),根据Maxadilan的氨基酸序列,设计并人工合成了在原核表达的基因.克隆到表达载体pKYB,重组质粒pKYB-MAX转化表达宿主菌Escherichia coli strain ER2566,构建表达工程菌.用诱导剂IPTG诱导由目的多肤、内含肽和几丁质结合域(Chitin binding domain,CBD)组成的"三元"融合蛋白表达;用几丁质珠亲和层析纯化了裂解液中的融合蛋白,用β-巯基乙醇切割融合蛋白,获得目的蛋白.所得的多肽经激光飞行质谱测定分子量结果与理论值相符,生物活性分析表明,重组Maxadilan有显著的提升血糖的作用.
為利用基因工程技術穫得重組Maxadilan(RMMAX),根據Maxadilan的氨基痠序列,設計併人工閤成瞭在原覈錶達的基因.剋隆到錶達載體pKYB,重組質粒pKYB-MAX轉化錶達宿主菌Escherichia coli strain ER2566,構建錶達工程菌.用誘導劑IPTG誘導由目的多膚、內含肽和幾丁質結閤域(Chitin binding domain,CBD)組成的"三元"融閤蛋白錶達;用幾丁質珠親和層析純化瞭裂解液中的融閤蛋白,用β-巰基乙醇切割融閤蛋白,穫得目的蛋白.所得的多肽經激光飛行質譜測定分子量結果與理論值相符,生物活性分析錶明,重組Maxadilan有顯著的提升血糖的作用.
위이용기인공정기술획득중조Maxadilan(RMMAX),근거Maxadilan적안기산서렬,설계병인공합성료재원핵표체적기인.극륭도표체재체pKYB,중조질립pKYB-MAX전화표체숙주균Escherichia coli strain ER2566,구건표체공정균.용유도제IPTG유도유목적다부、내함태화궤정질결합역(Chitin binding domain,CBD)조성적"삼원"융합단백표체;용궤정질주친화층석순화료렬해액중적융합단백,용β-구기을순절할융합단백,획득목적단백.소득적다태경격광비행질보측정분자량결과여이론치상부,생물활성분석표명,중조Maxadilan유현저적제승혈당적작용.
