中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2008年
11期
1470-1475
,共6页
长波紫外线%扇贝多肽%HaCaT角质形成细胞%c-jun%环氧合酶-2%凋亡
長波紫外線%扇貝多肽%HaCaT角質形成細胞%c-jun%環氧閤酶-2%凋亡
장파자외선%선패다태%HaCaT각질형성세포%c-jun%배양합매-2%조망
目的 复制UVA诱导的HaCaT细胞凋亡模型,研究UVA对细胞内c-jun和环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的影响,从而探究扇贝多肽(Polypeptide from Chlamys farreri,PCF)抑制UVA引起的HaCaT细胞凋亡的分子机制.方法 实验分为5组:正常对照组、UVA模型组、UVA+5.69 mmol·L-1PCF组、UVA+2.84 mmol·L-1PCF组、UVA+1.42 mmol·L-1 PCF组.应用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测细胞内c-jun的表达;RT-PCR结合蛋白质印迹法检测细胞内COX-2的表达;琼脂糖凝胶电泳分析PCF和COX-2特异性抑制剂celecoxib对UVA诱导HaCaT细胞凋亡的影响.结果 预先加入PCF和celecoxib均可明显抑制8 J·cm-2 UVA诱导的HaCaT细胞凋亡;UVA照射HaCaT细胞后COX-2 mRNA及蛋白表达水平增加,与对照组相比差异有显著性(P<0.01);1.42～5.69 mmol·L-1剂量范围内的PCF可剂量依赖性抑制UVA引起的细胞内COX-2 mRNA及蛋白表达(P<0.05,P<0.01);PCF也抑制了UVA引起的HaCaT细胞内c-jun表达的增加,且呈量效关系(P<0.05,P<0.01).结论 UVA诱导HaCaT细胞发生凋亡时,细胞内COX-2和c-jun的表达明显增加,PCF通过抑制细胞内COX-2和c-jun的表达而发挥其抗凋亡作用.
目的 複製UVA誘導的HaCaT細胞凋亡模型,研究UVA對細胞內c-jun和環氧閤酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的影響,從而探究扇貝多肽(Polypeptide from Chlamys farreri,PCF)抑製UVA引起的HaCaT細胞凋亡的分子機製.方法 實驗分為5組:正常對照組、UVA模型組、UVA+5.69 mmol·L-1PCF組、UVA+2.84 mmol·L-1PCF組、UVA+1.42 mmol·L-1 PCF組.應用實時熒光定量PCR和蛋白印跡法檢測細胞內c-jun的錶達;RT-PCR結閤蛋白質印跡法檢測細胞內COX-2的錶達;瓊脂糖凝膠電泳分析PCF和COX-2特異性抑製劑celecoxib對UVA誘導HaCaT細胞凋亡的影響.結果 預先加入PCF和celecoxib均可明顯抑製8 J·cm-2 UVA誘導的HaCaT細胞凋亡;UVA照射HaCaT細胞後COX-2 mRNA及蛋白錶達水平增加,與對照組相比差異有顯著性(P<0.01);1.42～5.69 mmol·L-1劑量範圍內的PCF可劑量依賴性抑製UVA引起的細胞內COX-2 mRNA及蛋白錶達(P<0.05,P<0.01);PCF也抑製瞭UVA引起的HaCaT細胞內c-jun錶達的增加,且呈量效關繫(P<0.05,P<0.01).結論 UVA誘導HaCaT細胞髮生凋亡時,細胞內COX-2和c-jun的錶達明顯增加,PCF通過抑製細胞內COX-2和c-jun的錶達而髮揮其抗凋亡作用.
목적 복제UVA유도적HaCaT세포조망모형,연구UVA대세포내c-jun화배양합매-2(cyclooxygenase-2,COX-2)적영향,종이탐구선패다태(Polypeptide from Chlamys farreri,PCF)억제UVA인기적HaCaT세포조망적분자궤제.방법 실험분위5조:정상대조조、UVA모형조、UVA+5.69 mmol·L-1PCF조、UVA+2.84 mmol·L-1PCF조、UVA+1.42 mmol·L-1 PCF조.응용실시형광정량PCR화단백인적법검측세포내c-jun적표체;RT-PCR결합단백질인적법검측세포내COX-2적표체;경지당응효전영분석PCF화COX-2특이성억제제celecoxib대UVA유도HaCaT세포조망적영향.결과 예선가입PCF화celecoxib균가명현억제8 J·cm-2 UVA유도적HaCaT세포조망;UVA조사HaCaT세포후COX-2 mRNA급단백표체수평증가,여대조조상비차이유현저성(P<0.01);1.42～5.69 mmol·L-1제량범위내적PCF가제량의뢰성억제UVA인기적세포내COX-2 mRNA급단백표체(P<0.05,P<0.01);PCF야억제료UVA인기적HaCaT세포내c-jun표체적증가,차정량효관계(P<0.05,P<0.01).결론 UVA유도HaCaT세포발생조망시,세포내COX-2화c-jun적표체명현증가,PCF통과억제세포내COX-2화c-jun적표체이발휘기항조망작용.
