现代检验医学杂志
現代檢驗醫學雜誌
현대검험의학잡지
JOURNAL OF MODERN LABORATORY MEDICINE
2008年
6期
9-11
,共3页
姜南艳%于文彬%苏明权%沈建军%李立文%郝晓柯%张惠中
薑南豔%于文彬%囌明權%瀋建軍%李立文%郝曉柯%張惠中
강남염%우문빈%소명권%침건군%리립문%학효가%장혜중
HMGB1 A盒%LBPK95A%加端-PCR%基因表达%纯化
HMGB1 A盒%LBPK95A%加耑-PCR%基因錶達%純化
HMGB1 A합%LBPK95A%가단-PCR%기인표체%순화
目的 克隆、表达高迁移率族蛋白1 A盒(HMGB1 A box)与LBPK95A的融合基因.方法 经加端-PCR获得HMGB1 A盒与LBPK95A的融合基因.该基因克隆到pGEX-4T-2载体中转化TOP10感受态细胞,测序鏊定.将A-LBP质粒转化E.coli BL21,30℃诱导表达4 h,超声裂解后经GSTrap FF蛋白纯化柱纯化,进行SDS-PAGE分析.结果 DNA测序证明,获得了HMGB1 A盒与LBPK95A的融合基因.SDS-PAGE分析表明,A-LBP融合蛋白在原核中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的28%,GSTrap FF纯化后获得目的蛋白.结论 成功表达和纯化了HMGB1 A盒与LBPK95A的融合蛋白.
目的 剋隆、錶達高遷移率族蛋白1 A盒(HMGB1 A box)與LBPK95A的融閤基因.方法 經加耑-PCR穫得HMGB1 A盒與LBPK95A的融閤基因.該基因剋隆到pGEX-4T-2載體中轉化TOP10感受態細胞,測序鏊定.將A-LBP質粒轉化E.coli BL21,30℃誘導錶達4 h,超聲裂解後經GSTrap FF蛋白純化柱純化,進行SDS-PAGE分析.結果 DNA測序證明,穫得瞭HMGB1 A盒與LBPK95A的融閤基因.SDS-PAGE分析錶明,A-LBP融閤蛋白在原覈中穫得高效錶達,錶達量約佔菌體總蛋白的28%,GSTrap FF純化後穫得目的蛋白.結論 成功錶達和純化瞭HMGB1 A盒與LBPK95A的融閤蛋白.
목적 극륭、표체고천이솔족단백1 A합(HMGB1 A box)여LBPK95A적융합기인.방법 경가단-PCR획득HMGB1 A합여LBPK95A적융합기인.해기인극륭도pGEX-4T-2재체중전화TOP10감수태세포,측서오정.장A-LBP질립전화E.coli BL21,30℃유도표체4 h,초성렬해후경GSTrap FF단백순화주순화,진행SDS-PAGE분석.결과 DNA측서증명,획득료HMGB1 A합여LBPK95A적융합기인.SDS-PAGE분석표명,A-LBP융합단백재원핵중획득고효표체,표체량약점균체총단백적28%,GSTrap FF순화후획득목적단백.결론 성공표체화순화료HMGB1 A합여LBPK95A적융합단백.
