生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2008年
4期
12-15
,共4页
代淑燕%寨鸿瑞%文明%刘忠伟%周碧君
代淑燕%寨鴻瑞%文明%劉忠偉%週碧君
대숙연%채홍서%문명%류충위%주벽군
鸭肠炎病毒%核衣壳蛋白基因%序列分析%原核表达
鴨腸炎病毒%覈衣殼蛋白基因%序列分析%原覈錶達
압장염병독%핵의각단백기인%서렬분석%원핵표체
目的:对DEV贵州分离株NP基因进行克隆与序列分析,构建NP基因的原核表达载体,分析NP基因原核表达产物的免疫反应性.方法:根据GeneBank登载的DEV NP基因序列设计引物,对DEV贵州分离株进行PCR扩增、克隆和测序,采用生物信息学软件程序分析NP蛋白的氨基酸序列;将该基因插入到原核表达载体pET32a上进行原核表达和Western Blotting分析.结果:DEV贵州分离株NP基因全长759bp,核苷酸序列与参考株一致;NP基因编码蛋白相对分子量为27.1kDa,理论pI为5.89,肽链上第10～15、88～92和182～186区段及其附近区域可能是B细胞表位优势区;构建得到的重组质粒pET32-NP可表达出一条大小约为48kDa的蛋白,且能与兔抗DEV-IgG发生特异性结合.结论:NP基因在DEV基因组中高度保守,其原核表达产物具有良好的免疫反应性.
目的:對DEV貴州分離株NP基因進行剋隆與序列分析,構建NP基因的原覈錶達載體,分析NP基因原覈錶達產物的免疫反應性.方法:根據GeneBank登載的DEV NP基因序列設計引物,對DEV貴州分離株進行PCR擴增、剋隆和測序,採用生物信息學軟件程序分析NP蛋白的氨基痠序列;將該基因插入到原覈錶達載體pET32a上進行原覈錶達和Western Blotting分析.結果:DEV貴州分離株NP基因全長759bp,覈苷痠序列與參攷株一緻;NP基因編碼蛋白相對分子量為27.1kDa,理論pI為5.89,肽鏈上第10～15、88～92和182～186區段及其附近區域可能是B細胞錶位優勢區;構建得到的重組質粒pET32-NP可錶達齣一條大小約為48kDa的蛋白,且能與兔抗DEV-IgG髮生特異性結閤.結論:NP基因在DEV基因組中高度保守,其原覈錶達產物具有良好的免疫反應性.
목적:대DEV귀주분리주NP기인진행극륭여서렬분석,구건NP기인적원핵표체재체,분석NP기인원핵표체산물적면역반응성.방법:근거GeneBank등재적DEV NP기인서렬설계인물,대DEV귀주분리주진행PCR확증、극륭화측서,채용생물신식학연건정서분석NP단백적안기산서렬;장해기인삽입도원핵표체재체pET32a상진행원핵표체화Western Blotting분석.결과:DEV귀주분리주NP기인전장759bp,핵감산서렬여삼고주일치;NP기인편마단백상대분자량위27.1kDa,이론pI위5.89,태련상제10～15、88～92화182～186구단급기부근구역가능시B세포표위우세구;구건득도적중조질립pET32-NP가표체출일조대소약위48kDa적단백,차능여토항DEV-IgG발생특이성결합.결론:NP기인재DEV기인조중고도보수,기원핵표체산물구유량호적면역반응성.
