检验检疫科学
檢驗檢疫科學
검험검역과학
INSPECTION AND QUARANTINE SCIENCE
2008年
4期
8-10
,共3页
王素华%曲道峰%蔡渭明%杜爱芳
王素華%麯道峰%蔡渭明%杜愛芳
왕소화%곡도봉%채위명%두애방
弓形虫%P30基因%基因克隆%原核表达
弓形蟲%P30基因%基因剋隆%原覈錶達
궁형충%P30기인%기인극륭%원핵표체
[目的]研究弓形虫P30基因的克隆及其在E.coli中的融合表达.[方法]参照弓形虫P30序列设计引物,应用PCR技术扩增出弓形虫RH株P30的部分基因,将扩增产物克隆到pUCm-T载体,测序正确后再亚克隆到质粒pET-30a中,得到重组质粒pET-30a-P30并将其转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Westen-blot分析.[结果]P30基因在E.coli中得到了高效表达,表达的融合蛋白的分子量在30kDa附近,可以被鼠抗Toxoplasma gondii阳性血清特异性识别.[结论]该研究为Toxoplasma gondii的检测和疫苗研制及综合防制奠定了基础.
[目的]研究弓形蟲P30基因的剋隆及其在E.coli中的融閤錶達.[方法]參照弓形蟲P30序列設計引物,應用PCR技術擴增齣弓形蟲RH株P30的部分基因,將擴增產物剋隆到pUCm-T載體,測序正確後再亞剋隆到質粒pET-30a中,得到重組質粒pET-30a-P30併將其轉化大腸桿菌BL21,IPTG誘導錶達,錶達產物經SDS-PAGE和Westen-blot分析.[結果]P30基因在E.coli中得到瞭高效錶達,錶達的融閤蛋白的分子量在30kDa附近,可以被鼠抗Toxoplasma gondii暘性血清特異性識彆.[結論]該研究為Toxoplasma gondii的檢測和疫苗研製及綜閤防製奠定瞭基礎.
[목적]연구궁형충P30기인적극륭급기재E.coli중적융합표체.[방법]삼조궁형충P30서렬설계인물,응용PCR기술확증출궁형충RH주P30적부분기인,장확증산물극륭도pUCm-T재체,측서정학후재아극륭도질립pET-30a중,득도중조질립pET-30a-P30병장기전화대장간균BL21,IPTG유도표체,표체산물경SDS-PAGE화Westen-blot분석.[결과]P30기인재E.coli중득도료고효표체,표체적융합단백적분자량재30kDa부근,가이피서항Toxoplasma gondii양성혈청특이성식별.[결론]해연구위Toxoplasma gondii적검측화역묘연제급종합방제전정료기출.
