军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2008年
5期
436-438
,共3页
蔡昆%包士中%史晶%刘昊%高翔%王慧
蔡昆%包士中%史晶%劉昊%高翔%王慧
채곤%포사중%사정%류호%고상%왕혜
大肠杆菌%细菌菌蜕%噬菌体PhiX174裂解基因E%温度控制
大腸桿菌%細菌菌蛻%噬菌體PhiX174裂解基因E%溫度控製
대장간균%세균균세%서균체PhiX174렬해기인E%온도공제
目的:利用温度控制噬菌体PhiX174裂解基因E的表达,制备大肠杆菌细菌菌蜕,鉴定其裂解效率并观察其形态.方法:利用PCR技术扩增分离了噬菌体PhiX174裂解基因E并构建其表达质粒,并将质粒转化大肠杆菌DH5α构建工程菌.工程菌培养温度从28℃突升至42℃,每15 min检测菌液D600值,诱导后4 h收集菌体.体外菌落计数计算裂解效率,并通过电镜观察菌蜕结构.结果:获得273 bp的PhiX174裂解基因E全长基因及表达质粒.菌液D600在温度突升至42℃后30 min开始持续下降,2 h后基本维持不变.4 h后收集菌体测得裂解效率为99.99%.电镜观察菌蜕为具有完整外膜结构的细菌空壳,并且无细胞毒性.结论:本研究成功利用噬菌体PhiX174裂解基因E实现了大肠杆菌细菌菌蜕的制备,为进一步的疫苗及递送系统研究奠定了基础.
目的:利用溫度控製噬菌體PhiX174裂解基因E的錶達,製備大腸桿菌細菌菌蛻,鑒定其裂解效率併觀察其形態.方法:利用PCR技術擴增分離瞭噬菌體PhiX174裂解基因E併構建其錶達質粒,併將質粒轉化大腸桿菌DH5α構建工程菌.工程菌培養溫度從28℃突升至42℃,每15 min檢測菌液D600值,誘導後4 h收集菌體.體外菌落計數計算裂解效率,併通過電鏡觀察菌蛻結構.結果:穫得273 bp的PhiX174裂解基因E全長基因及錶達質粒.菌液D600在溫度突升至42℃後30 min開始持續下降,2 h後基本維持不變.4 h後收集菌體測得裂解效率為99.99%.電鏡觀察菌蛻為具有完整外膜結構的細菌空殼,併且無細胞毒性.結論:本研究成功利用噬菌體PhiX174裂解基因E實現瞭大腸桿菌細菌菌蛻的製備,為進一步的疫苗及遞送繫統研究奠定瞭基礎.
목적:이용온도공제서균체PhiX174렬해기인E적표체,제비대장간균세균균세,감정기렬해효솔병관찰기형태.방법:이용PCR기술확증분리료서균체PhiX174렬해기인E병구건기표체질립,병장질립전화대장간균DH5α구건공정균.공정균배양온도종28℃돌승지42℃,매15 min검측균액D600치,유도후4 h수집균체.체외균락계수계산렬해효솔,병통과전경관찰균세결구.결과:획득273 bp적PhiX174렬해기인E전장기인급표체질립.균액D600재온도돌승지42℃후30 min개시지속하강,2 h후기본유지불변.4 h후수집균체측득렬해효솔위99.99%.전경관찰균세위구유완정외막결구적세균공각,병차무세포독성.결론:본연구성공이용서균체PhiX174렬해기인E실현료대장간균세균균세적제비,위진일보적역묘급체송계통연구전정료기출.
