中国肺癌杂志
中國肺癌雜誌
중국폐암잡지
CHINESE JOURNAL OF LUNG CANCER
2008年
4期
509-512
,共4页
韩昱晨%官忠燕%段红梅%唐娜%刘俊%韩艳玲
韓昱晨%官忠燕%段紅梅%唐娜%劉俊%韓豔玲
한욱신%관충연%단홍매%당나%류준%한염령
酵母双杂交%肺肿瘤%MCM7
酵母雙雜交%肺腫瘤%MCM7
효모쌍잡교%폐종류%MCM7
背景与目的 微小染色体维持蛋白(mini-chromosome maintenance proteins,MCM)MCM7为MCM复合体成员之一,在启动DNA复制、合成中起关键作用,但对能够与其结合的蛋白所知甚少.本研究应用酵母双杂交方法筛选肺癌组织中MCM7蛋白的结合蛋白.方法构建MCM7全长cDNA-pGBKT7质粒,与含肺癌组织cDNA文库-pACT2质粒转化酵母AH109,在涂有X-a-gal营养缺陷型培养基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)上筛选生长,挑选蓝色克隆,提取此酵母克隆的质粒,转化大肠杆菌提取质粒DNA后测序,进行生物信息学分析.结果 筛选出11种与MCM7蛋白特异性相互作用的蛋白,其中细胞骨架蛋白5种,各种酶、激酶以及相关受体6种.结论 克隆到的基因对进一步研究MCM7蛋白的功能有一定提示作用.
揹景與目的 微小染色體維持蛋白(mini-chromosome maintenance proteins,MCM)MCM7為MCM複閤體成員之一,在啟動DNA複製、閤成中起關鍵作用,但對能夠與其結閤的蛋白所知甚少.本研究應用酵母雙雜交方法篩選肺癌組織中MCM7蛋白的結閤蛋白.方法構建MCM7全長cDNA-pGBKT7質粒,與含肺癌組織cDNA文庫-pACT2質粒轉化酵母AH109,在塗有X-a-gal營養缺陷型培養基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)上篩選生長,挑選藍色剋隆,提取此酵母剋隆的質粒,轉化大腸桿菌提取質粒DNA後測序,進行生物信息學分析.結果 篩選齣11種與MCM7蛋白特異性相互作用的蛋白,其中細胞骨架蛋白5種,各種酶、激酶以及相關受體6種.結論 剋隆到的基因對進一步研究MCM7蛋白的功能有一定提示作用.
배경여목적 미소염색체유지단백(mini-chromosome maintenance proteins,MCM)MCM7위MCM복합체성원지일,재계동DNA복제、합성중기관건작용,단대능구여기결합적단백소지심소.본연구응용효모쌍잡교방법사선폐암조직중MCM7단백적결합단백.방법구건MCM7전장cDNA-pGBKT7질립,여함폐암조직cDNA문고-pACT2질립전화효모AH109,재도유X-a-gal영양결함형배양기(SD/-Trp-Leu-His-Ade)상사선생장,도선람색극륭,제취차효모극륭적질립,전화대장간균제취질립DNA후측서,진행생물신식학분석.결과 사선출11충여MCM7단백특이성상호작용적단백,기중세포골가단백5충,각충매、격매이급상관수체6충.결론 극륭도적기인대진일보연구MCM7단백적공능유일정제시작용.
