医学研究生学报
醫學研究生學報
의학연구생학보
JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATE
2008年
4期
367-371
,共5页
万文辉%吴恒芳%杨笛%张寄南
萬文輝%吳恆芳%楊笛%張寄南
만문휘%오항방%양적%장기남
心肌肌钙蛋白Ⅰ%定点突变%重组腺病毒
心肌肌鈣蛋白Ⅰ%定點突變%重組腺病毒
심기기개단백Ⅰ%정점돌변%중조선병독
目的:构建SD大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)赖氨酸(Lys)184缺失突变重组腺病毒载体.方法:利用PCR定点突变方法给大鼠cTn I基因引入Lys184缺失突变,将扩增片段克隆至pMD18-T载体,在C末端用PCR法加6×组氨酸(His)标签序列后,再亚克隆至Adeno-X腺病毒DNA,转染HEK 293细胞,包装形成重组腺病毒(Ad-cTnI Lys184del).结果:PCR及测序结果表明,重组腺病毒序列正确,Western blot证明有融合突变蛋白表达.结论:本研究成功地构建了大鼠cTnI Lys184缺失突变重组腺病毒载体,为后续的功能研究提供了有价值的研究材料.
目的:構建SD大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTnI)賴氨痠(Lys)184缺失突變重組腺病毒載體.方法:利用PCR定點突變方法給大鼠cTn I基因引入Lys184缺失突變,將擴增片段剋隆至pMD18-T載體,在C末耑用PCR法加6×組氨痠(His)標籤序列後,再亞剋隆至Adeno-X腺病毒DNA,轉染HEK 293細胞,包裝形成重組腺病毒(Ad-cTnI Lys184del).結果:PCR及測序結果錶明,重組腺病毒序列正確,Western blot證明有融閤突變蛋白錶達.結論:本研究成功地構建瞭大鼠cTnI Lys184缺失突變重組腺病毒載體,為後續的功能研究提供瞭有價值的研究材料.
목적:구건SD대서심기기개단백Ⅰ(cTnI)뢰안산(Lys)184결실돌변중조선병독재체.방법:이용PCR정점돌변방법급대서cTn I기인인입Lys184결실돌변,장확증편단극륭지pMD18-T재체,재C말단용PCR법가6×조안산(His)표첨서렬후,재아극륭지Adeno-X선병독DNA,전염HEK 293세포,포장형성중조선병독(Ad-cTnI Lys184del).결과:PCR급측서결과표명,중조선병독서렬정학,Western blot증명유융합돌변단백표체.결론:본연구성공지구건료대서cTnI Lys184결실돌변중조선병독재체,위후속적공능연구제공료유개치적연구재료.
