安徽医药
安徽醫藥
안휘의약
ANHUI MEDICAL AND PHARMACEUTICAL JOURNAL
2008年
4期
297-299
,共3页
纪文婷%许严伟%张霄翔%崔春萍%张庆林
紀文婷%許嚴偉%張霄翔%崔春萍%張慶林
기문정%허엄위%장소상%최춘평%장경림
TRAIL%发酵%纯化%生物活性
TRAIL%髮酵%純化%生物活性
TRAIL%발효%순화%생물활성
目的 研究rhTRAIL114-281在大肠杆菌中的表达及其纯化产物对肿瘤细胞的生长抑制作用.方法 将经过酶切鉴定的原核表达载体pET-23d(+)/TRAIL114-281转化入宿主菌E.coli w3110,优化目标蛋白表达条件,用离子交换色谱法纯化.目标蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定,HPLC检测纯化蛋白纯度,最终用MTT法检测其生物学活性.结果 rhTRAIL蛋白最高表达量可占菌体总蛋白的50%以上,可溶性形式存在的目标蛋白约占上清总蛋白的25%,离子交换纯化后,可溶形式rhTRAIL 对人口腔癌细胞KBV200有明显的生长抑制作用.结论 rhTRAIL蛋白可在转化了重组质粒pET-23d(+)/TRAIL114-281的宿主菌E.coli w3110中高效表达,纯化所得的可溶形式rhTRAIL 对肿瘤细胞有明显的生长抑制作用,该工作为进一步研究开发rhTRAIL奠定了一定的基础.
目的 研究rhTRAIL114-281在大腸桿菌中的錶達及其純化產物對腫瘤細胞的生長抑製作用.方法 將經過酶切鑒定的原覈錶達載體pET-23d(+)/TRAIL114-281轉化入宿主菌E.coli w3110,優化目標蛋白錶達條件,用離子交換色譜法純化.目標蛋白經SDS-PAGE及Western blot鑒定,HPLC檢測純化蛋白純度,最終用MTT法檢測其生物學活性.結果 rhTRAIL蛋白最高錶達量可佔菌體總蛋白的50%以上,可溶性形式存在的目標蛋白約佔上清總蛋白的25%,離子交換純化後,可溶形式rhTRAIL 對人口腔癌細胞KBV200有明顯的生長抑製作用.結論 rhTRAIL蛋白可在轉化瞭重組質粒pET-23d(+)/TRAIL114-281的宿主菌E.coli w3110中高效錶達,純化所得的可溶形式rhTRAIL 對腫瘤細胞有明顯的生長抑製作用,該工作為進一步研究開髮rhTRAIL奠定瞭一定的基礎.
목적 연구rhTRAIL114-281재대장간균중적표체급기순화산물대종류세포적생장억제작용.방법 장경과매절감정적원핵표체재체pET-23d(+)/TRAIL114-281전화입숙주균E.coli w3110,우화목표단백표체조건,용리자교환색보법순화.목표단백경SDS-PAGE급Western blot감정,HPLC검측순화단백순도,최종용MTT법검측기생물학활성.결과 rhTRAIL단백최고표체량가점균체총단백적50%이상,가용성형식존재적목표단백약점상청총단백적25%,리자교환순화후,가용형식rhTRAIL 대인구강암세포KBV200유명현적생장억제작용.결론 rhTRAIL단백가재전화료중조질립pET-23d(+)/TRAIL114-281적숙주균E.coli w3110중고효표체,순화소득적가용형식rhTRAIL 대종류세포유명현적생장억제작용,해공작위진일보연구개발rhTRAIL전정료일정적기출.
