分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2008年
1期
177-182
,共6页
陈万胜%王元英%罗成刚%杨爱国%蒋彩虹%范静苑
陳萬勝%王元英%囉成剛%楊愛國%蔣綵虹%範靜苑
진만성%왕원영%라성강%양애국%장채홍%범정원
烟草%SRAP%正交设计%优化
煙草%SRAP%正交設計%優化
연초%SRAP%정교설계%우화
利用正交设计L16(45)对烟草SRAP-PCR反应体系的五因素(Taq酶,Mg2+模板DNA,dNTP,引物)在四个水平上进行优化试验,PCR结果用统计软件SPSS V13.0分析,得出如下结论:各因素的不同水平对PCR反应结果都有显著的影响,其中Taq酶量影响最大;筛选出各反应因素的最佳水平,建立烟草SRAP-PCR反应的最佳体系(25μL)为:Taq酶1.0 U,Mg2+1.5 mmol/L,模板DNA 30.00～120.00 ng,dNTP0.1 mmol/L,引物0.40 μmol/L.最后,应用烟草SRAP-PCR最佳反应体系对PCR扩增程序中的退火温度及循环次数进行了筛选,得出SRAP-PCR扩增以52℃退火温度、35个循环次数为最佳.这一优化系统的建立为今后利用SRAP标记技术对烟草进行基础研究提供了一个标准化的程序.
利用正交設計L16(45)對煙草SRAP-PCR反應體繫的五因素(Taq酶,Mg2+模闆DNA,dNTP,引物)在四箇水平上進行優化試驗,PCR結果用統計軟件SPSS V13.0分析,得齣如下結論:各因素的不同水平對PCR反應結果都有顯著的影響,其中Taq酶量影響最大;篩選齣各反應因素的最佳水平,建立煙草SRAP-PCR反應的最佳體繫(25μL)為:Taq酶1.0 U,Mg2+1.5 mmol/L,模闆DNA 30.00～120.00 ng,dNTP0.1 mmol/L,引物0.40 μmol/L.最後,應用煙草SRAP-PCR最佳反應體繫對PCR擴增程序中的退火溫度及循環次數進行瞭篩選,得齣SRAP-PCR擴增以52℃退火溫度、35箇循環次數為最佳.這一優化繫統的建立為今後利用SRAP標記技術對煙草進行基礎研究提供瞭一箇標準化的程序.
이용정교설계L16(45)대연초SRAP-PCR반응체계적오인소(Taq매,Mg2+모판DNA,dNTP,인물)재사개수평상진행우화시험,PCR결과용통계연건SPSS V13.0분석,득출여하결론:각인소적불동수평대PCR반응결과도유현저적영향,기중Taq매량영향최대;사선출각반응인소적최가수평,건립연초SRAP-PCR반응적최가체계(25μL)위:Taq매1.0 U,Mg2+1.5 mmol/L,모판DNA 30.00～120.00 ng,dNTP0.1 mmol/L,인물0.40 μmol/L.최후,응용연초SRAP-PCR최가반응체계대PCR확증정서중적퇴화온도급순배차수진행료사선,득출SRAP-PCR확증이52℃퇴화온도、35개순배차수위최가.저일우화계통적건립위금후이용SRAP표기기술대연초진행기출연구제공료일개표준화적정서.
