环境科学
環境科學
배경과학
CHINESE JOURNAL OF ENVIRONMENTAL SCIENCE
2008年
2期
462-468
,共7页
王君%马挺%刘静%刘清坤%赵玲侠%梁凤来%刘如林
王君%馬挺%劉靜%劉清坤%趙玲俠%樑鳳來%劉如林
왕군%마정%류정%류청곤%조령협%량봉래%류여림
油藏%梯度凝胶变性电泳(DGGE)%16S rDNA%高温解烃菌%培养技术
油藏%梯度凝膠變性電泳(DGGE)%16S rDNA%高溫解烴菌%培養技術
유장%제도응효변성전영(DGGE)%16S rDNA%고온해경균%배양기술
采用PCR-DGGE技术对高温油藏的微生物群落进行了多样性分析,并将得到的信息用于指导油藏微生物的分离.本研究通过PCR-DGGE技术对油藏水样中DNA的16S rDNA V3、V8、V9 3个高可变区的扩增产物进行了比较,确定采用可得到更多微生物多样性信息的V9区引物进行PCR扩增,优势条带序列分析表明,在高温油藏中存在的微生物与GenBank数据库中α,β,y-变形杆菌和芽孢杆菌的序列相似性最高.利用多元细菌培养技术,以序列信息为指导,采用富集培养、直接培养和特殊培养的方法,从水样中分离出5株高温菌(而传统分离方法只能获得3株),其中3株高温解烃菌分别属于Bacillus属、Geobacillus属和Petrobacter属,它们能够在55℃以上兼性厌氧条件良好生长,对原油的降解率分别为56.5%、70.01%和31.87%,对原油的降粘率分别为40%、54.55%和29.09%,使原油的凝固点分别降低3.7、5.2和3.1℃.因此,序列指导和改变培养条件是分离更多有效采油微生物的改进方法,这3株高温菌的对原油的作用效果证明其具备提高石油采收率的潜力.
採用PCR-DGGE技術對高溫油藏的微生物群落進行瞭多樣性分析,併將得到的信息用于指導油藏微生物的分離.本研究通過PCR-DGGE技術對油藏水樣中DNA的16S rDNA V3、V8、V9 3箇高可變區的擴增產物進行瞭比較,確定採用可得到更多微生物多樣性信息的V9區引物進行PCR擴增,優勢條帶序列分析錶明,在高溫油藏中存在的微生物與GenBank數據庫中α,β,y-變形桿菌和芽孢桿菌的序列相似性最高.利用多元細菌培養技術,以序列信息為指導,採用富集培養、直接培養和特殊培養的方法,從水樣中分離齣5株高溫菌(而傳統分離方法隻能穫得3株),其中3株高溫解烴菌分彆屬于Bacillus屬、Geobacillus屬和Petrobacter屬,它們能夠在55℃以上兼性厭氧條件良好生長,對原油的降解率分彆為56.5%、70.01%和31.87%,對原油的降粘率分彆為40%、54.55%和29.09%,使原油的凝固點分彆降低3.7、5.2和3.1℃.因此,序列指導和改變培養條件是分離更多有效採油微生物的改進方法,這3株高溫菌的對原油的作用效果證明其具備提高石油採收率的潛力.
채용PCR-DGGE기술대고온유장적미생물군락진행료다양성분석,병장득도적신식용우지도유장미생물적분리.본연구통과PCR-DGGE기술대유장수양중DNA적16S rDNA V3、V8、V9 3개고가변구적확증산물진행료비교,학정채용가득도경다미생물다양성신식적V9구인물진행PCR확증,우세조대서렬분석표명,재고온유장중존재적미생물여GenBank수거고중α,β,y-변형간균화아포간균적서렬상사성최고.이용다원세균배양기술,이서렬신식위지도,채용부집배양、직접배양화특수배양적방법,종수양중분리출5주고온균(이전통분리방법지능획득3주),기중3주고온해경균분별속우Bacillus속、Geobacillus속화Petrobacter속,타문능구재55℃이상겸성염양조건량호생장,대원유적강해솔분별위56.5%、70.01%화31.87%,대원유적강점솔분별위40%、54.55%화29.09%,사원유적응고점분별강저3.7、5.2화3.1℃.인차,서렬지도화개변배양조건시분리경다유효채유미생물적개진방법,저3주고온균적대원유적작용효과증명기구비제고석유채수솔적잠력.