生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2007年
6期
1055-1059
,共5页
周宏敏%洪宇植%肖亚中%CUI Teng-Jiao%WANG Xiao-Tang%蒲春蕾
週宏敏%洪宇植%肖亞中%CUI Teng-Jiao%WANG Xiao-Tang%蒲春蕾
주굉민%홍우식%초아중%CUI Teng-Jiao%WANG Xiao-Tang%포춘뢰
异源表达%高密度发酵%漆酶%毕赤酵母%栓菌420
異源錶達%高密度髮酵%漆酶%畢赤酵母%栓菌420
이원표체%고밀도발효%칠매%필적효모%전균420
栓菌420(Trametes sp.420)漆酶基因lacD以两种方式在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)进行异源表达,产生两种重组漆酶:rLacDx(具有天然N-末端)和rLacDe(N-末端带有8个额外的氨基酸残基).摇瓶发酵18d,rLacDx和rLacDe的产量分别为1.21×105u/L、7.38 x 104u/L[以2,2'-连氮-3-乙苯-二噻唑-6磺酸(ABTS)为底物].在高密度发酵条件下,rLacDx的产量增加到2.39×105u/L,同时其生产周期降至7.5d.两种重组酶对愈创木酚底物的氧化特性相似,且在50℃和pH3～10的范围内均稳定.然而,rLacDx对底物ABTS的比活力(1761u/mg)高于rLacDe(1122u/mg),其表现Km值(427μmol/L)低于rLacDe(604μmol/L).
栓菌420(Trametes sp.420)漆酶基因lacD以兩種方式在巴斯德畢赤酵母(Pichia pastoris)進行異源錶達,產生兩種重組漆酶:rLacDx(具有天然N-末耑)和rLacDe(N-末耑帶有8箇額外的氨基痠殘基).搖瓶髮酵18d,rLacDx和rLacDe的產量分彆為1.21×105u/L、7.38 x 104u/L[以2,2'-連氮-3-乙苯-二噻唑-6磺痠(ABTS)為底物].在高密度髮酵條件下,rLacDx的產量增加到2.39×105u/L,同時其生產週期降至7.5d.兩種重組酶對愈創木酚底物的氧化特性相似,且在50℃和pH3～10的範圍內均穩定.然而,rLacDx對底物ABTS的比活力(1761u/mg)高于rLacDe(1122u/mg),其錶現Km值(427μmol/L)低于rLacDe(604μmol/L).
전균420(Trametes sp.420)칠매기인lacD이량충방식재파사덕필적효모(Pichia pastoris)진행이원표체,산생량충중조칠매:rLacDx(구유천연N-말단)화rLacDe(N-말단대유8개액외적안기산잔기).요병발효18d,rLacDx화rLacDe적산량분별위1.21×105u/L、7.38 x 104u/L[이2,2'-련담-3-을분-이새서-6광산(ABTS)위저물].재고밀도발효조건하,rLacDx적산량증가도2.39×105u/L,동시기생산주기강지7.5d.량충중조매대유창목분저물적양화특성상사,차재50℃화pH3～10적범위내균은정.연이,rLacDx대저물ABTS적비활력(1761u/mg)고우rLacDe(1122u/mg),기표현Km치(427μmol/L)저우rLacDe(604μmol/L).
