高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2007年
11期
1184-1191
,共8页
孙晓凤%黄容%胡炜%肖梦颖%汪亚平%郭琼林
孫曉鳳%黃容%鬍煒%肖夢穎%汪亞平%郭瓊林
손효봉%황용%호위%초몽영%왕아평%곽경림
"全鱼"生长激素基因%转基因鲤鱼%胸腺发育%抑制性差减杂交(SSH)%表达序列标签(EST)
"全魚"生長激素基因%轉基因鯉魚%胸腺髮育%抑製性差減雜交(SSH)%錶達序列標籤(EST)
"전어"생장격소기인%전기인리어%흉선발육%억제성차감잡교(SSH)%표체서렬표첨(EST)
采用显微注射方法,获得了转"全鱼"生长激素(GH)基因鲤鱼(转基因鱼),应用抑制性差减杂交(SSH)技术,构建了4月龄F3转基因鱼胸腺发育差减cDNA文库,筛选并鉴定了与胸腺发育相关的81个与已知基因同源的表达序列标签(EST).这些EST至少代表69个基因.根据基因的作用将其分为5类:18个与免疫和细胞防御有关;23个参与细胞生长、发育和分化等代谢过程;3个参与细胞信号传导和周期调控;8个在转录和表达调节中发挥作用;17个为核糖体蛋白基因,表明转基因鱼胸腺细胞处于活跃的蛋白合成状态.应用RT-PCR和虚拟Northern杂交技术进一步证实其中的若干基因在转基因鱼胸腺组织中的表达量增加.实验结果为阐明转植GH基因促进鲤鱼胸腺发育的相关分子机制提供了依据.
採用顯微註射方法,穫得瞭轉"全魚"生長激素(GH)基因鯉魚(轉基因魚),應用抑製性差減雜交(SSH)技術,構建瞭4月齡F3轉基因魚胸腺髮育差減cDNA文庫,篩選併鑒定瞭與胸腺髮育相關的81箇與已知基因同源的錶達序列標籤(EST).這些EST至少代錶69箇基因.根據基因的作用將其分為5類:18箇與免疫和細胞防禦有關;23箇參與細胞生長、髮育和分化等代謝過程;3箇參與細胞信號傳導和週期調控;8箇在轉錄和錶達調節中髮揮作用;17箇為覈糖體蛋白基因,錶明轉基因魚胸腺細胞處于活躍的蛋白閤成狀態.應用RT-PCR和虛擬Northern雜交技術進一步證實其中的若榦基因在轉基因魚胸腺組織中的錶達量增加.實驗結果為闡明轉植GH基因促進鯉魚胸腺髮育的相關分子機製提供瞭依據.
채용현미주사방법,획득료전"전어"생장격소(GH)기인리어(전기인어),응용억제성차감잡교(SSH)기술,구건료4월령F3전기인어흉선발육차감cDNA문고,사선병감정료여흉선발육상관적81개여이지기인동원적표체서렬표첨(EST).저사EST지소대표69개기인.근거기인적작용장기분위5류:18개여면역화세포방어유관;23개삼여세포생장、발육화분화등대사과정;3개삼여세포신호전도화주기조공;8개재전록화표체조절중발휘작용;17개위핵당체단백기인,표명전기인어흉선세포처우활약적단백합성상태.응용RT-PCR화허의Northern잡교기술진일보증실기중적약간기인재전기인어흉선조직중적표체량증가.실험결과위천명전식GH기인촉진리어흉선발육적상관분자궤제제공료의거.
