山东大学学报(医学版)
山東大學學報(醫學版)
산동대학학보(의학판)
JOURNAL OF SHANGDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2007年
7期
649-654
,共6页
王家增%暴丽华%孙晋浩%李振华%张静
王傢增%暴麗華%孫晉浩%李振華%張靜
왕가증%폭려화%손진호%리진화%장정
小鼠,转基因%神经上皮%干细胞%增殖%移植
小鼠,轉基因%神經上皮%榦細胞%增殖%移植
소서,전기인%신경상피%간세포%증식%이식
目的:观察GFP转基因鼠胚胎神经上皮干细胞的体外培养及脑内移植后的存活与分化状况.方法:将GFP转基因鼠的胚胎神经上皮干细胞置于无血清培养基内纯化扩增,用巢蛋白免疫组织化学染色鉴定神经干细胞,将扩增后的含GFP基因的神经干细胞在立体定位仪下,定向移植到大鼠的纹状体内.术后不同时期取材、切片,在荧光显微镜下观察移植细胞的存活状况,行微管相关蛋白(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学染色鉴定移植细胞的分化状况.结果:GFP转基因鼠神经管来源的神经上皮干细胞在无血清培养基内能增殖形成神经球,呈巢蛋白阳性.纹状体内移植2周、4周均可见明显的呈绿色荧光的移植细胞,显示细胞存活良好.免疫组织化学染色显示移植细胞在不同间隔时间可分化为MAP-2、GFAP及TH阳性细胞.结论:GFP转基因鼠来源的具有GFP标记的胚胎神经上皮干细胞可在体外培养扩增,移植到大鼠纹状体内存活良好并能分化成神经元、神经胶质细胞,且能定向分化为多巴胺能神经元.
目的:觀察GFP轉基因鼠胚胎神經上皮榦細胞的體外培養及腦內移植後的存活與分化狀況.方法:將GFP轉基因鼠的胚胎神經上皮榦細胞置于無血清培養基內純化擴增,用巢蛋白免疫組織化學染色鑒定神經榦細胞,將擴增後的含GFP基因的神經榦細胞在立體定位儀下,定嚮移植到大鼠的紋狀體內.術後不同時期取材、切片,在熒光顯微鏡下觀察移植細胞的存活狀況,行微管相關蛋白(MAP-2)、膠質纖維痠性蛋白(GFAP)以及酪氨痠羥化酶(TH)免疫組織化學染色鑒定移植細胞的分化狀況.結果:GFP轉基因鼠神經管來源的神經上皮榦細胞在無血清培養基內能增殖形成神經毬,呈巢蛋白暘性.紋狀體內移植2週、4週均可見明顯的呈綠色熒光的移植細胞,顯示細胞存活良好.免疫組織化學染色顯示移植細胞在不同間隔時間可分化為MAP-2、GFAP及TH暘性細胞.結論:GFP轉基因鼠來源的具有GFP標記的胚胎神經上皮榦細胞可在體外培養擴增,移植到大鼠紋狀體內存活良好併能分化成神經元、神經膠質細胞,且能定嚮分化為多巴胺能神經元.
목적:관찰GFP전기인서배태신경상피간세포적체외배양급뇌내이식후적존활여분화상황.방법:장GFP전기인서적배태신경상피간세포치우무혈청배양기내순화확증,용소단백면역조직화학염색감정신경간세포,장확증후적함GFP기인적신경간세포재입체정위의하,정향이식도대서적문상체내.술후불동시기취재、절편,재형광현미경하관찰이식세포적존활상황,행미관상관단백(MAP-2)、효질섬유산성단백(GFAP)이급락안산간화매(TH)면역조직화학염색감정이식세포적분화상황.결과:GFP전기인서신경관래원적신경상피간세포재무혈청배양기내능증식형성신경구,정소단백양성.문상체내이식2주、4주균가견명현적정록색형광적이식세포,현시세포존활량호.면역조직화학염색현시이식세포재불동간격시간가분화위MAP-2、GFAP급TH양성세포.결론:GFP전기인서래원적구유GFP표기적배태신경상피간세포가재체외배양확증,이식도대서문상체내존활량호병능분화성신경원、신경효질세포,차능정향분화위다파알능신경원.