中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2007年
11期
2081-2086
,共6页
李树仁%齐晓勇%刘会良%孟寸良%王天红%党懿%张建清%吴迪%董洁%李英肖%郜利会%靳福昌
李樹仁%齊曉勇%劉會良%孟吋良%王天紅%黨懿%張建清%吳迪%董潔%李英肖%郜利會%靳福昌
리수인%제효용%류회량%맹촌량%왕천홍%당의%장건청%오적%동길%리영초%고리회%근복창
单核细胞/移植%间质干细胞%心肌梗塞%血管成形术,经腔,经皮冠状动脉
單覈細胞/移植%間質榦細胞%心肌梗塞%血管成形術,經腔,經皮冠狀動脈
단핵세포/이식%간질간세포%심기경새%혈관성형술,경강,경피관상동맥
目的:为保护濒死心肌提供机会窗口,对比观察经冠脉移植自体骨髓单个核细胞或间充质干细胞后,实验性急性心肌梗死动物心功能变化及心肌组织核转录因子κB、心肌细胞凋亡情况.方法:实验于2005-03/2006-11在河北省人民医院实验中心完成.选用24只雄性冀中白猪,随机数字表法分为4组:正常对照组、模型组、单个核细胞组、间充质干细胞组,6只/组.①24只猪均以盐酸氯胺酮200 mg臀部肌肉注射麻醉后,分别于各自右侧股骨抽取骨髓20 mL,采用Fercoll法分离获得骨髓单个核细胞,加入胶体金溶液,培养12～16 h待用.分离过程中取出含有骨髓单个核细胞成分的细胞层,常规培养传代,每3 d换液1次,贴壁生长细胞即为骨髓间充质干细胞,加入胶体金溶液,培养24 h待用.②除正常对照组外,其余各组均经导管球囊封闭第一对角支以远的前降支,复制猪急性心肌梗死模型.单个核细胞组、间充质干细胞组均于造模后立即开通前降支,分别经球囊注入预先分离的骨髓单个核细胞6×108个、间充质干细胞6×108个.模型组造模后于梗死1 h开通前降支,经球囊注入磷酸盐缓冲液10 mL.③各组分别于术前及术后4周经心脏超声检测心功能,取材行病理学检查、心肌组织核转录因子κB的免疫组织化学检测及心肌细胞凋亡检测.结果:24只雄性白猪均进入结果分析.①心功能变化:术前各组左心室收缩末内径、左心室舒张末内径、左心室射血分数、短轴缩短率基本相似.移植术后4周,正常对照组、单个核细胞组、间充质干细胞组左心室舒张末内径均明显低于模型组(F=4.68,P=0.01),左心室射血分数及短轴缩短率均明显高于模型组(F=5.14,P=0.01;F=3.32,P=0.04),各组左心室收缩末内径差异无显著性意义(F=1.64,P=0.21).②心肌组织病理学改变:电镜下单个核细胞组、间充质干细胞组在梗死边缘区可见有胶体金颗粒的不成熟的心肌细胞,胞质中散在肌丝结构,肌丝排列紊乱不规则.③心肌组织核转录因子κB阳性率表达:与模型组比较,单个核细胞组、间充质干细胞组的梗死边缘区核转录因子κB阳性率明显降低(F=25.59,P=0.0001);正常心肌区核转录因子κB阳性率亦明显降低(F=18.20,P=0.0001).④心肌细胞凋亡检测结果:与模型组比较,单个核细胞组、间充质干细胞组在心肌梗死区细胞凋亡率均明显降低(F=6.63,P=0.0027),梗死边缘区细胞凋亡率亦明显降低(F=36.07,P=0.0001).正常心肌区单个核细胞组细胞凋亡率与模型组基本相似(F=9.69,P=0.004),但间充质干细胞组有所降低.⑤心功能与心肌细胞凋亡及心肌组织NF-κB的相关性:急性心肌梗死4周时,左心室射血分数与心肌细胞凋亡、心肌组织核转录因子κB均呈负相关(r=0.613,P=0.001;r-0.437,P=0.033).心肌细胞凋亡与心肌组织核转录因子κB呈正相关(r=0.672,P=0.002).结论:经冠脉移植骨髓单个核细胞和间充质干细胞均可改善实验性急性心肌梗死动物的心功能,与梗死边缘区核转录因子κB表达降低及心肌细胞凋亡减少有关.骨髓单个核细胞移植的促血管增生作用优于间充质干细胞移植.
目的:為保護瀕死心肌提供機會窗口,對比觀察經冠脈移植自體骨髓單箇覈細胞或間充質榦細胞後,實驗性急性心肌梗死動物心功能變化及心肌組織覈轉錄因子κB、心肌細胞凋亡情況.方法:實驗于2005-03/2006-11在河北省人民醫院實驗中心完成.選用24隻雄性冀中白豬,隨機數字錶法分為4組:正常對照組、模型組、單箇覈細胞組、間充質榦細胞組,6隻/組.①24隻豬均以鹽痠氯胺酮200 mg臀部肌肉註射痳醉後,分彆于各自右側股骨抽取骨髓20 mL,採用Fercoll法分離穫得骨髓單箇覈細胞,加入膠體金溶液,培養12～16 h待用.分離過程中取齣含有骨髓單箇覈細胞成分的細胞層,常規培養傳代,每3 d換液1次,貼壁生長細胞即為骨髓間充質榦細胞,加入膠體金溶液,培養24 h待用.②除正常對照組外,其餘各組均經導管毬囊封閉第一對角支以遠的前降支,複製豬急性心肌梗死模型.單箇覈細胞組、間充質榦細胞組均于造模後立即開通前降支,分彆經毬囊註入預先分離的骨髓單箇覈細胞6×108箇、間充質榦細胞6×108箇.模型組造模後于梗死1 h開通前降支,經毬囊註入燐痠鹽緩遲液10 mL.③各組分彆于術前及術後4週經心髒超聲檢測心功能,取材行病理學檢查、心肌組織覈轉錄因子κB的免疫組織化學檢測及心肌細胞凋亡檢測.結果:24隻雄性白豬均進入結果分析.①心功能變化:術前各組左心室收縮末內徑、左心室舒張末內徑、左心室射血分數、短軸縮短率基本相似.移植術後4週,正常對照組、單箇覈細胞組、間充質榦細胞組左心室舒張末內徑均明顯低于模型組(F=4.68,P=0.01),左心室射血分數及短軸縮短率均明顯高于模型組(F=5.14,P=0.01;F=3.32,P=0.04),各組左心室收縮末內徑差異無顯著性意義(F=1.64,P=0.21).②心肌組織病理學改變:電鏡下單箇覈細胞組、間充質榦細胞組在梗死邊緣區可見有膠體金顆粒的不成熟的心肌細胞,胞質中散在肌絲結構,肌絲排列紊亂不規則.③心肌組織覈轉錄因子κB暘性率錶達:與模型組比較,單箇覈細胞組、間充質榦細胞組的梗死邊緣區覈轉錄因子κB暘性率明顯降低(F=25.59,P=0.0001);正常心肌區覈轉錄因子κB暘性率亦明顯降低(F=18.20,P=0.0001).④心肌細胞凋亡檢測結果:與模型組比較,單箇覈細胞組、間充質榦細胞組在心肌梗死區細胞凋亡率均明顯降低(F=6.63,P=0.0027),梗死邊緣區細胞凋亡率亦明顯降低(F=36.07,P=0.0001).正常心肌區單箇覈細胞組細胞凋亡率與模型組基本相似(F=9.69,P=0.004),但間充質榦細胞組有所降低.⑤心功能與心肌細胞凋亡及心肌組織NF-κB的相關性:急性心肌梗死4週時,左心室射血分數與心肌細胞凋亡、心肌組織覈轉錄因子κB均呈負相關(r=0.613,P=0.001;r-0.437,P=0.033).心肌細胞凋亡與心肌組織覈轉錄因子κB呈正相關(r=0.672,P=0.002).結論:經冠脈移植骨髓單箇覈細胞和間充質榦細胞均可改善實驗性急性心肌梗死動物的心功能,與梗死邊緣區覈轉錄因子κB錶達降低及心肌細胞凋亡減少有關.骨髓單箇覈細胞移植的促血管增生作用優于間充質榦細胞移植.
목적:위보호빈사심기제공궤회창구,대비관찰경관맥이식자체골수단개핵세포혹간충질간세포후,실험성급성심기경사동물심공능변화급심기조직핵전록인자κB、심기세포조망정황.방법:실험우2005-03/2006-11재하북성인민의원실험중심완성.선용24지웅성기중백저,수궤수자표법분위4조:정상대조조、모형조、단개핵세포조、간충질간세포조,6지/조.①24지저균이염산록알동200 mg둔부기육주사마취후,분별우각자우측고골추취골수20 mL,채용Fercoll법분리획득골수단개핵세포,가입효체금용액,배양12～16 h대용.분리과정중취출함유골수단개핵세포성분적세포층,상규배양전대,매3 d환액1차,첩벽생장세포즉위골수간충질간세포,가입효체금용액,배양24 h대용.②제정상대조조외,기여각조균경도관구낭봉폐제일대각지이원적전강지,복제저급성심기경사모형.단개핵세포조、간충질간세포조균우조모후립즉개통전강지,분별경구낭주입예선분리적골수단개핵세포6×108개、간충질간세포6×108개.모형조조모후우경사1 h개통전강지,경구낭주입린산염완충액10 mL.③각조분별우술전급술후4주경심장초성검측심공능,취재행병이학검사、심기조직핵전록인자κB적면역조직화학검측급심기세포조망검측.결과:24지웅성백저균진입결과분석.①심공능변화:술전각조좌심실수축말내경、좌심실서장말내경、좌심실사혈분수、단축축단솔기본상사.이식술후4주,정상대조조、단개핵세포조、간충질간세포조좌심실서장말내경균명현저우모형조(F=4.68,P=0.01),좌심실사혈분수급단축축단솔균명현고우모형조(F=5.14,P=0.01;F=3.32,P=0.04),각조좌심실수축말내경차이무현저성의의(F=1.64,P=0.21).②심기조직병이학개변:전경하단개핵세포조、간충질간세포조재경사변연구가견유효체금과립적불성숙적심기세포,포질중산재기사결구,기사배렬문란불규칙.③심기조직핵전록인자κB양성솔표체:여모형조비교,단개핵세포조、간충질간세포조적경사변연구핵전록인자κB양성솔명현강저(F=25.59,P=0.0001);정상심기구핵전록인자κB양성솔역명현강저(F=18.20,P=0.0001).④심기세포조망검측결과:여모형조비교,단개핵세포조、간충질간세포조재심기경사구세포조망솔균명현강저(F=6.63,P=0.0027),경사변연구세포조망솔역명현강저(F=36.07,P=0.0001).정상심기구단개핵세포조세포조망솔여모형조기본상사(F=9.69,P=0.004),단간충질간세포조유소강저.⑤심공능여심기세포조망급심기조직NF-κB적상관성:급성심기경사4주시,좌심실사혈분수여심기세포조망、심기조직핵전록인자κB균정부상관(r=0.613,P=0.001;r-0.437,P=0.033).심기세포조망여심기조직핵전록인자κB정정상관(r=0.672,P=0.002).결론:경관맥이식골수단개핵세포화간충질간세포균가개선실험성급성심기경사동물적심공능,여경사변연구핵전록인자κB표체강저급심기세포조망감소유관.골수단개핵세포이식적촉혈관증생작용우우간충질간세포이식.
