中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2007年
6期
750-755
,共6页
骆丹%林向飞%徐晶%高洁%刘昕%金颂良%苏荣建%闵玮%沈春花
駱丹%林嚮飛%徐晶%高潔%劉昕%金頌良%囌榮建%閔瑋%瀋春花
락단%림향비%서정%고길%류흔%금송량%소영건%민위%침춘화
中波紫外线%EGCG%川芎%黄芩%胸腺嘧啶二聚体%NER%p53%PCNA
中波紫外線%EGCG%川芎%黃芩%胸腺嘧啶二聚體%NER%p53%PCNA
중파자외선%EGCG%천궁%황금%흉선밀정이취체%NER%p53%PCNA
目的 观察中波紫外线(UVB)辐射后HaCaT细胞光产物胸腺嘧啶二聚体(cyclobutanepyrimidine dimers,CPDs)的生成和清除情况及3种中药活性成分:黄芩(baikal skullcap root,BSR)、川芎(szechwan lovge rhizome,SLR)和表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对该过程的干预情况并探讨上述药物对相关调控分子的作用机制.方法 以含10%小牛血清的RMPI 1640培养基培养永生化人角质形成细胞株HaCaT细胞,根据实验设计定时定量照射培养细胞并预先或UVB辐射后加入相关药物进行干预处理.免疫组织化学法检测CPDs;RT-PCR法检测受试各组细胞p53和PCNA基因mRNA表达;Western blot法检测受试各组细胞p53和PCNA蛋白表达.结果 HaCaT细胞损伤程度随照光剂量加大而加重;30mJ/cm2 UVB照射后细胞CPDs生成量在辐射后0.5 h左右达到高峰,同时细胞也开始清除CPDs,辐射后4h内清除速率较快,4h后清除速率逐渐降低,照光前加入黄芩溶液,可以减少CPDs生成,照光后即刻加入川芎和EGCG溶液,可加快CPDs清除(P＜0.05);UVB照射后可明显增加HaCaT细胞中p53和PCNA mRNA及蛋白表达水平,药物可在不同程度上下调上述基因及蛋白表达.结论 UVB辐射对HaCaT细胞的损伤程度呈剂量依赖性并导致DNA损伤而产生光产物CPDs,细胞自身有清除CPDs的能力,所试3种中药均可减少光产物水平;这种光保护作用可能与受试中药影响p53和PCNA基因mR-NA和蛋白表达有关.
目的 觀察中波紫外線(UVB)輻射後HaCaT細胞光產物胸腺嘧啶二聚體(cyclobutanepyrimidine dimers,CPDs)的生成和清除情況及3種中藥活性成分:黃芩(baikal skullcap root,BSR)、川芎(szechwan lovge rhizome,SLR)和錶沒食子兒茶素沒食子痠酯[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]對該過程的榦預情況併探討上述藥物對相關調控分子的作用機製.方法 以含10%小牛血清的RMPI 1640培養基培養永生化人角質形成細胞株HaCaT細胞,根據實驗設計定時定量照射培養細胞併預先或UVB輻射後加入相關藥物進行榦預處理.免疫組織化學法檢測CPDs;RT-PCR法檢測受試各組細胞p53和PCNA基因mRNA錶達;Western blot法檢測受試各組細胞p53和PCNA蛋白錶達.結果 HaCaT細胞損傷程度隨照光劑量加大而加重;30mJ/cm2 UVB照射後細胞CPDs生成量在輻射後0.5 h左右達到高峰,同時細胞也開始清除CPDs,輻射後4h內清除速率較快,4h後清除速率逐漸降低,照光前加入黃芩溶液,可以減少CPDs生成,照光後即刻加入川芎和EGCG溶液,可加快CPDs清除(P＜0.05);UVB照射後可明顯增加HaCaT細胞中p53和PCNA mRNA及蛋白錶達水平,藥物可在不同程度上下調上述基因及蛋白錶達.結論 UVB輻射對HaCaT細胞的損傷程度呈劑量依賴性併導緻DNA損傷而產生光產物CPDs,細胞自身有清除CPDs的能力,所試3種中藥均可減少光產物水平;這種光保護作用可能與受試中藥影響p53和PCNA基因mR-NA和蛋白錶達有關.
목적 관찰중파자외선(UVB)복사후HaCaT세포광산물흉선밀정이취체(cyclobutanepyrimidine dimers,CPDs)적생성화청제정황급3충중약활성성분:황금(baikal skullcap root,BSR)、천궁(szechwan lovge rhizome,SLR)화표몰식자인다소몰식자산지[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]대해과정적간예정황병탐토상술약물대상관조공분자적작용궤제.방법 이함10%소우혈청적RMPI 1640배양기배양영생화인각질형성세포주HaCaT세포,근거실험설계정시정량조사배양세포병예선혹UVB복사후가입상관약물진행간예처리.면역조직화학법검측CPDs;RT-PCR법검측수시각조세포p53화PCNA기인mRNA표체;Western blot법검측수시각조세포p53화PCNA단백표체.결과 HaCaT세포손상정도수조광제량가대이가중;30mJ/cm2 UVB조사후세포CPDs생성량재복사후0.5 h좌우체도고봉,동시세포야개시청제CPDs,복사후4h내청제속솔교쾌,4h후청제속솔축점강저,조광전가입황금용액,가이감소CPDs생성,조광후즉각가입천궁화EGCG용액,가가쾌CPDs청제(P＜0.05);UVB조사후가명현증가HaCaT세포중p53화PCNA mRNA급단백표체수평,약물가재불동정도상하조상술기인급단백표체.결론 UVB복사대HaCaT세포적손상정도정제량의뢰성병도치DNA손상이산생광산물CPDs,세포자신유청제CPDs적능력,소시3충중약균가감소광산물수평;저충광보호작용가능여수시중약영향p53화PCNA기인mR-NA화단백표체유관.
