医药世界
醫藥世界
의약세계
MEDICINE WORLD
2007年
2期
46-48
,共3页
隐匿性乙型肝炎病毒感染%嵌套式PCR引物%PCR%HBV DNA%HBV血清学标志
隱匿性乙型肝炎病毒感染%嵌套式PCR引物%PCR%HBV DNA%HBV血清學標誌
은닉성을형간염병독감염%감투식PCR인물%PCR%HBV DNA%HBV혈청학표지
目的:由于国内目前尚无检测隐匿性乙型肝炎病毒(Occult Hepatitis B Virus;OHBV)感染的试剂盒且OHBV患者的特点是HBsAg阴性,血清中存在低水平的HBV DNA,用常规的检测方法不能检测出来;急需研制灵敏度高、特异性强的PCR方法,来探讨青岛市是否存在OHBV感染.方法 根据OHBV血清图谱的特点随机收集了OHBV可疑样本100份,采用试剂盒和酚/氯仿两种方法提取DNA,PCR扩增及其引物设计按Kanneko等的方法进行并进行了改进.结果 1.经改进的酚/氯仿法提取OHBV DNA优于试剂盒法.2.常规PCR引物组合109-588扩增,所有样品的109-588组合均无扩增产物;使用嵌套式PCR引物组合1763-1778-2017-2032进行扩增,33份样品出现了HBV特异性扩增带.3.在OHBV不同血清图谱样品中均检出OHBV DNA,总检出率为33%,其中anti-HBs+anti-HBc阳性组中OHBV DNA检出率最高(43.33%);anti-Hbe+anti-HBc阳性组中OHBV DNA检出率最低(18.18%).结论 酚/氯仿法提取OHBV DNA经改良,优于试剂盒法,常规PCR方法不能检测出OHBV DNA,而嵌套式PCR方法可达到诊断OHBV的目的.本实验首次在青岛运用自行设计的OHBV检测体系,在OHBV可疑人群中检测出OHBV DNA,为有针对性地管理OHBV传染源提供了可靠依据和检测方法.
目的:由于國內目前尚無檢測隱匿性乙型肝炎病毒(Occult Hepatitis B Virus;OHBV)感染的試劑盒且OHBV患者的特點是HBsAg陰性,血清中存在低水平的HBV DNA,用常規的檢測方法不能檢測齣來;急需研製靈敏度高、特異性彊的PCR方法,來探討青島市是否存在OHBV感染.方法 根據OHBV血清圖譜的特點隨機收集瞭OHBV可疑樣本100份,採用試劑盒和酚/氯倣兩種方法提取DNA,PCR擴增及其引物設計按Kanneko等的方法進行併進行瞭改進.結果 1.經改進的酚/氯倣法提取OHBV DNA優于試劑盒法.2.常規PCR引物組閤109-588擴增,所有樣品的109-588組閤均無擴增產物;使用嵌套式PCR引物組閤1763-1778-2017-2032進行擴增,33份樣品齣現瞭HBV特異性擴增帶.3.在OHBV不同血清圖譜樣品中均檢齣OHBV DNA,總檢齣率為33%,其中anti-HBs+anti-HBc暘性組中OHBV DNA檢齣率最高(43.33%);anti-Hbe+anti-HBc暘性組中OHBV DNA檢齣率最低(18.18%).結論 酚/氯倣法提取OHBV DNA經改良,優于試劑盒法,常規PCR方法不能檢測齣OHBV DNA,而嵌套式PCR方法可達到診斷OHBV的目的.本實驗首次在青島運用自行設計的OHBV檢測體繫,在OHBV可疑人群中檢測齣OHBV DNA,為有針對性地管理OHBV傳染源提供瞭可靠依據和檢測方法.
목적:유우국내목전상무검측은닉성을형간염병독(Occult Hepatitis B Virus;OHBV)감염적시제합차OHBV환자적특점시HBsAg음성,혈청중존재저수평적HBV DNA,용상규적검측방법불능검측출래;급수연제령민도고、특이성강적PCR방법,래탐토청도시시부존재OHBV감염.방법 근거OHBV혈청도보적특점수궤수집료OHBV가의양본100빈,채용시제합화분/록방량충방법제취DNA,PCR확증급기인물설계안Kanneko등적방법진행병진행료개진.결과 1.경개진적분/록방법제취OHBV DNA우우시제합법.2.상규PCR인물조합109-588확증,소유양품적109-588조합균무확증산물;사용감투식PCR인물조합1763-1778-2017-2032진행확증,33빈양품출현료HBV특이성확증대.3.재OHBV불동혈청도보양품중균검출OHBV DNA,총검출솔위33%,기중anti-HBs+anti-HBc양성조중OHBV DNA검출솔최고(43.33%);anti-Hbe+anti-HBc양성조중OHBV DNA검출솔최저(18.18%).결론 분/록방법제취OHBV DNA경개량,우우시제합법,상규PCR방법불능검측출OHBV DNA,이감투식PCR방법가체도진단OHBV적목적.본실험수차재청도운용자행설계적OHBV검측체계,재OHBV가의인군중검측출OHBV DNA,위유침대성지관리OHBV전염원제공료가고의거화검측방법.
