动物学研究
動物學研究
동물학연구
ZOOLOGICAL RESEARCH
2007年
1期
81-87
,共7页
袁晓华%王淑芬%杨世华%李亚辉%陈洪伟%季维智
袁曉華%王淑芬%楊世華%李亞輝%陳洪偉%季維智
원효화%왕숙분%양세화%리아휘%진홍위%계유지
兔胚胎干细胞%慢速冷冻%防冻液%谷氨酰胺
兔胚胎榦細胞%慢速冷凍%防凍液%穀氨酰胺
토배태간세포%만속냉동%방동액%곡안선알
干细胞冷冻保存是干细胞研究和临床应用中的必需技术.为提高兔胚胎干细胞在慢速冻存过程中的保存效果,比较了二甲基亚砜(DMSO)和乙二醇(ethylene glycol,EG)对兔胚胎干细胞冷冻保护效果.对冷冻复苏后的细胞进行台盼蓝染色,并研究其胚胎干细胞分子特性,结果表明DMSO比EG具有更好的冷冻保护效果.再在以10% DMSO为基础的防冻液中添加膜稳定剂海藻糖(trehalose)或谷氨酰胺(glutamine),细胞冷冻复苏后结果显示,谷氨酰胺对兔胚胎干细胞有明显的冷冻保护作用,使细胞存活率从71%提高到83.7%.当谷氨酰胺浓度为0、5、10、20、40 mmol/L分别加入防冻液中后,20 mmol/L的谷氨酰胺具有最佳的冷冻保护效果.以上结果得出兔胚胎干细胞慢速冷冻的防冻液改进配方为:在胚胎干细胞培养液中添加10% DMSO+20 mmol/L谷氨酰胺.
榦細胞冷凍保存是榦細胞研究和臨床應用中的必需技術.為提高兔胚胎榦細胞在慢速凍存過程中的保存效果,比較瞭二甲基亞砜(DMSO)和乙二醇(ethylene glycol,EG)對兔胚胎榦細胞冷凍保護效果.對冷凍複囌後的細胞進行檯盼藍染色,併研究其胚胎榦細胞分子特性,結果錶明DMSO比EG具有更好的冷凍保護效果.再在以10% DMSO為基礎的防凍液中添加膜穩定劑海藻糖(trehalose)或穀氨酰胺(glutamine),細胞冷凍複囌後結果顯示,穀氨酰胺對兔胚胎榦細胞有明顯的冷凍保護作用,使細胞存活率從71%提高到83.7%.噹穀氨酰胺濃度為0、5、10、20、40 mmol/L分彆加入防凍液中後,20 mmol/L的穀氨酰胺具有最佳的冷凍保護效果.以上結果得齣兔胚胎榦細胞慢速冷凍的防凍液改進配方為:在胚胎榦細胞培養液中添加10% DMSO+20 mmol/L穀氨酰胺.
간세포냉동보존시간세포연구화림상응용중적필수기술.위제고토배태간세포재만속동존과정중적보존효과,비교료이갑기아풍(DMSO)화을이순(ethylene glycol,EG)대토배태간세포냉동보호효과.대냉동복소후적세포진행태반람염색,병연구기배태간세포분자특성,결과표명DMSO비EG구유경호적냉동보호효과.재재이10% DMSO위기출적방동액중첨가막은정제해조당(trehalose)혹곡안선알(glutamine),세포냉동복소후결과현시,곡안선알대토배태간세포유명현적냉동보호작용,사세포존활솔종71%제고도83.7%.당곡안선알농도위0、5、10、20、40 mmol/L분별가입방동액중후,20 mmol/L적곡안선알구유최가적냉동보호효과.이상결과득출토배태간세포만속냉동적방동액개진배방위:재배태간세포배양액중첨가10% DMSO+20 mmol/L곡안선알.
