中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2007年
1期
58-62
,共5页
张长禹%孟建玉%张小亚%雷朝亮
張長禹%孟建玉%張小亞%雷朝亮
장장우%맹건옥%장소아%뢰조량
实蝇%RAPD%体系优化
實蠅%RAPD%體繫優化
실승%RAPD%체계우화
以几种常见的实蝇为材料,研究了实蝇RAPD分析过程中的影响因素,包括模板DNA浓度、dNTP、引物、Taq酶、变性时间、循环次数、退火温度等,建立了适于实蝇RAPD分析的PCR反应体系:在25μl反应体系中,模板DNA用量为80ng,MgCl 2浓度为2.0mM;四种dNTP浓度各为0.2mM;Taq引物浓度为0.5μM;酶用量为1U;扩增程序:先94℃预变性3min,再94℃变性45s、36℃退火1min、72℃延伸2min共40个循环,最后延伸10min.
以幾種常見的實蠅為材料,研究瞭實蠅RAPD分析過程中的影響因素,包括模闆DNA濃度、dNTP、引物、Taq酶、變性時間、循環次數、退火溫度等,建立瞭適于實蠅RAPD分析的PCR反應體繫:在25μl反應體繫中,模闆DNA用量為80ng,MgCl 2濃度為2.0mM;四種dNTP濃度各為0.2mM;Taq引物濃度為0.5μM;酶用量為1U;擴增程序:先94℃預變性3min,再94℃變性45s、36℃退火1min、72℃延伸2min共40箇循環,最後延伸10min.
이궤충상견적실승위재료,연구료실승RAPD분석과정중적영향인소,포괄모판DNA농도、dNTP、인물、Taq매、변성시간、순배차수、퇴화온도등,건립료괄우실승RAPD분석적PCR반응체계:재25μl반응체계중,모판DNA용량위80ng,MgCl 2농도위2.0mM;사충dNTP농도각위0.2mM;Taq인물농도위0.5μM;매용량위1U;확증정서:선94℃예변성3min,재94℃변성45s、36℃퇴화1min、72℃연신2min공40개순배,최후연신10min.