CAJ | 학술논문

目的:制备抗人脑钠肽单克隆抗体并对其进行初步鉴定.方法:实验于2004-12/2006-02在南京医科大学第一附属医院心血管病研究所进行.利用碳化二亚胺法将合成的人脑钠肽与牛血清白蛋白偶联制备完全抗原,反复免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术将免疫小鼠的脾细胞与Balb/c小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)在PEG下融合,HAT选择性培养,间接酶联免疫吸附方法对细胞培养上清检测、筛选,选择筛选结果脑钠肽抗体阳性的细胞株连续进行3次亚克隆,建立稳定分泌脑钠肽单克隆抗体的杂交瘤细胞株.扩大培养阳性单克隆细胞株后,腹腔注射小鼠,制备腹水.对腹水亲和层析纯化,所得的单克隆抗体行初步鉴定.结果:免疫小鼠血清呈脑钠肽抗体阳性,经筛选得到3株稳定分泌脑钠肽单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化的单克隆抗体经鉴定为IgG型,蛋白质印迹分析证实单克隆抗体可特异识别脑钠肽,具备较高的特异性及敏感性.结论:成功制备了3株抗脑钠肽特异性的单克隆抗体,可用于脑钠肽免疫检测方法的建立.
목적:제비항인뇌납태단극륭항체병대기진행초보감정.방법:실험우2004-12/2006-02재남경의과대학제일부속의원심혈관병연구소진행.이용탄화이아알법장합성적인뇌납태여우혈청백단백우련제비완전항원,반복면역Balb/c소서,응용잡교류기술장면역소서적비세포여Balb/c소서골수류세포(SP2/0)재PEG하융합,HAT선택성배양,간접매련면역흡부방법대세포배양상청검측、사선,선택사선결과뇌납태항체양성적세포주련속진행3차아극륭,건립은정분비뇌납태단극륭항체적잡교류세포주.확대배양양성단극륭세포주후,복강주사소서,제비복수.대복수친화층석순화,소득적단극륭항체행초보감정.결과:면역소서혈청정뇌납태항체양성,경사선득도3주은정분비뇌납태단극륭항체적잡교류세포주,순화적단극륭항체경감정위IgG형,단백질인적분석증실단극륭항체가특이식별뇌납태,구비교고적특이성급민감성.결론:성공제비료3주항뇌납태특이성적단극륭항체,가용우뇌납태면역검측방법적건립.