木聚糖酶XYNB的N46D突变、表达及酶学性质变化
목취당매XYNB적N46D돌변、표체급매학성질변화
N46D Mutagenesis of Xylanase XYNB and Enzymatic Changes of Expression Product
  • 万方数据
    中国生物化学与分子生物学报 중국생물화학여분자생물학보
    CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
    2006年 3期 204-211 ,共8页

    杨浩萌%柏映国%李江%罗会颖%王亚茹%伍宁丰%范云六%姚斌

    양호맹%백영국%리강%라회영%왕아여%오저봉%범운륙%요빈

    木聚糖酶%XYNBN46D%定点突变%pH特性 木聚糖酶%XYNBN46D%定點突變%pH特性
    목취당매%XYNBN46D%정점돌변%pH특성
    对来源于Streptomyces olivaceoviridis的高比活木聚糖酶XYNB进行同源建模和同源序列比较,发现第11族木聚糖酶的催化结构域在β折叠股A3和B3之间存的一个保守的氨基酸位点,该位点与木聚糖酶的pH特性有关.据此设计了XYNB的N46D定点突变.将突变酶XYNBN46D在毕赤酵母中表达,表达的XYNBN46D经纯化后与原酶XYNB(同样经毕赤酵母表达后纯化)进行酶学性质比较,结果表明,XYNBN46D的最适pH值由5.2下降到4.2,pH稳定性也向酸性pH偏移,同时,热稳定性和最适温度也有一定的提高,但酶的比活性显著下降.结果证实,木聚糖酶XYNB的第46位Asn与其最适pH值相关.对导致酶学性质改变的可能因素进行了分析,结果为进一步的结构与功能研究提供了资料.
    대래원우Streptomyces olivaceoviridis적고비활목취당매XYNB진행동원건모화동원서렬비교,발현제11족목취당매적최화결구역재β절첩고A3화B3지간존적일개보수적안기산위점,해위점여목취당매적pH특성유관.거차설계료XYNB적N46D정점돌변.장돌변매XYNBN46D재필적효모중표체,표체적XYNBN46D경순화후여원매XYNB(동양경필적효모표체후순화)진행매학성질비교,결과표명,XYNBN46D적최괄pH치유5.2하강도4.2,pH은정성야향산성pH편이,동시,열은정성화최괄온도야유일정적제고,단매적비활성현저하강.결과증실,목취당매XYNB적제46위Asn여기최괄pH치상관.대도치매학성질개변적가능인소진행료분석,결과위진일보적결구여공능연구제공료자료.
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