CAJ | 학술논문

目的:运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术阻断前列腺癌细胞系PC3中survivin基因的表达,并研究survivin基因沉默后对PC3细胞产生的影响.方法:用真核转录载体pSilencerTM3.1-H1 neo构建针对survivin基因的重组真核转录载体pSilencer 3.1-SVV1、pSilencer 3.1-SVV2和pSilencer 3.1-SVV3,并用脂质体法转染前列腺癌细胞系PC3,通过RT-PCR、蛋白印迹实验检测survivin的表达变化,并用流式细胞术、MTT法检测转染后PC3细胞的凋亡、细胞周期、细胞生长速度、对顺铂的敏感性等方面的变化.结果:重组载体pSilencer 3.1-SVV2和pSilencer 3.1-SVV3有效地阻断了PC3细胞中survivin基因在mRNA和蛋白水平上的表达(P＜0.01).重组载体转染PC3细胞后,与对照组相比,细胞的凋亡增加了10%～15%;细胞生长速度明显变慢,其细胞数在84 h时与对照组相比减少约30%;G1期细胞增加了10%,G2期和S期细胞减少了5%以上.加入顺铂后,pSilencer 3.1-SVV2、pSilencer 3.1-SVV3重组质粒转染的PC3细胞的存活数下降了35%～45%,细胞凋亡则增加了10%～14%.结论:初步证明了survivin基因在前列腺癌细胞分化增殖、抗凋亡等方面所扮演的重要角色,为进一步阐明survivin基因与前列腺癌的关系以及以survivin基因为靶点的前列腺癌基因治疗研究奠定了基础.
목적:운용RNA간우(RNA interference,RNAi)기술조단전렬선암세포계PC3중survivin기인적표체,병연구survivin기인침묵후대PC3세포산생적영향.방법:용진핵전록재체pSilencerTM3.1-H1 neo구건침대survivin기인적중조진핵전록재체pSilencer 3.1-SVV1、pSilencer 3.1-SVV2화pSilencer 3.1-SVV3,병용지질체법전염전렬선암세포계PC3,통과RT-PCR、단백인적실험검측survivin적표체변화,병용류식세포술、MTT법검측전염후PC3세포적조망、세포주기、세포생장속도、대순박적민감성등방면적변화.결과:중조재체pSilencer 3.1-SVV2화pSilencer 3.1-SVV3유효지조단료PC3세포중survivin기인재mRNA화단백수평상적표체(P＜0.01).중조재체전염PC3세포후,여대조조상비,세포적조망증가료10%～15%;세포생장속도명현변만,기세포수재84 h시여대조조상비감소약30%;G1기세포증가료10%,G2기화S기세포감소료5%이상.가입순박후,pSilencer 3.1-SVV2、pSilencer 3.1-SVV3중조질립전염적PC3세포적존활수하강료35%～45%,세포조망칙증가료10%～14%.결론:초보증명료survivin기인재전렬선암세포분화증식、항조망등방면소분연적중요각색,위진일보천명survivin기인여전렬선암적관계이급이survivin기인위파점적전렬선암기인치료연구전정료기출.