四川大学学报（医学版）
四川大學學報（醫學版）
사천대학학보（의학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2005年
6期
782-785
,共4页
曾浩%廖咏川%王芳%吴琦%杨宇如
曾浩%廖詠川%王芳%吳琦%楊宇如
증호%료영천%왕방%오기%양우여
前列腺特异性膜抗原%启动子%反向增强子%前列腺癌%绿色荧光蛋白
前列腺特異性膜抗原%啟動子%反嚮增彊子%前列腺癌%綠色熒光蛋白
전렬선특이성막항원%계동자%반향증강자%전렬선암%록색형광단백
目的探讨前列腺特异性膜抗原(PSMA)启动子和增强子调控目的基因表达的前列腺细胞特异性,了解增强子增强转录效率的能力.方法采用PCR方法从前列腺癌细胞DNA中分别扩增PSMA增强子序列,将其按不同方向亚克隆到含有报告基因--绿色荧光蛋白(GFP)的重组质粒载体pEGFP-PSMAPro,脂质体介导基因转染不同癌细胞并观察GFP在所转染的细胞的表达情况.结果成功构建质粒pEGFP-PSMAE-P和pEGFP-PSMAE(r)-P,质粒转染结果显示PSMA表达阳性的LNCaP细胞中存在GFP的特异有效表达,增强子序列能使基因转录效率提高30倍,不同方向的增强子序列在增强转录效率方面具有同样效应.结论反向PSMA增强子启动子调控GFP表达的重组质粒的构建证明该调控序列具有前列腺细胞特异性,增强子具有增强启动子转录效率的功能且没有方向性.
目的探討前列腺特異性膜抗原(PSMA)啟動子和增彊子調控目的基因錶達的前列腺細胞特異性,瞭解增彊子增彊轉錄效率的能力.方法採用PCR方法從前列腺癌細胞DNA中分彆擴增PSMA增彊子序列,將其按不同方嚮亞剋隆到含有報告基因--綠色熒光蛋白(GFP)的重組質粒載體pEGFP-PSMAPro,脂質體介導基因轉染不同癌細胞併觀察GFP在所轉染的細胞的錶達情況.結果成功構建質粒pEGFP-PSMAE-P和pEGFP-PSMAE(r)-P,質粒轉染結果顯示PSMA錶達暘性的LNCaP細胞中存在GFP的特異有效錶達,增彊子序列能使基因轉錄效率提高30倍,不同方嚮的增彊子序列在增彊轉錄效率方麵具有同樣效應.結論反嚮PSMA增彊子啟動子調控GFP錶達的重組質粒的構建證明該調控序列具有前列腺細胞特異性,增彊子具有增彊啟動子轉錄效率的功能且沒有方嚮性.
목적탐토전렬선특이성막항원(PSMA)계동자화증강자조공목적기인표체적전렬선세포특이성,료해증강자증강전록효솔적능력.방법채용PCR방법종전렬선암세포DNA중분별확증PSMA증강자서렬,장기안불동방향아극륭도함유보고기인--록색형광단백(GFP)적중조질립재체pEGFP-PSMAPro,지질체개도기인전염불동암세포병관찰GFP재소전염적세포적표체정황.결과성공구건질립pEGFP-PSMAE-P화pEGFP-PSMAE(r)-P,질립전염결과현시PSMA표체양성적LNCaP세포중존재GFP적특이유효표체,증강자서렬능사기인전록효솔제고30배,불동방향적증강자서렬재증강전록효솔방면구유동양효응.결론반향PSMA증강자계동자조공GFP표체적중조질립적구건증명해조공서렬구유전렬선세포특이성,증강자구유증강계동자전록효솔적공능차몰유방향성.
