徐州医学院学报
徐州醫學院學報
서주의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU
2001年
4期
313-316
,共4页
白细胞介素-18结合蛋白%克隆%逆转录病毒载体
白細胞介素-18結閤蛋白%剋隆%逆轉錄病毒載體
백세포개소-18결합단백%극륭%역전록병독재체
目的克隆人白细胞介素-18结合蛋白(hIL-18BP)的cDNA及构建hIL-18BP逆转录病毒载体,以研究IL-18BP与IL-18相互作用的机制及自身免疫性疾病的基因治疗.方法从中国汉族人胎盘组织中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增hIL-18BP cDNA,与载体pcDNA3连接,转化大肠杆菌DH5α.得到的重组质粒经鉴定正确后,再作为模板进行PCR.PCR产物插入逆转录病毒载体pLNCX中.结果 RT-PCR扩增出全长585 bp的hIL-18BP cDNA,2次酶切鉴定证明hIL-18BP已分别与pcDNA3、pLNCX重组.2次测序结果均与国外文献报道的hIL-18BP的序列一致.结论成功地克隆了中国人IL-18BP cDNA,并构建了重组hIL-18BP逆转录病毒载体.
目的剋隆人白細胞介素-18結閤蛋白(hIL-18BP)的cDNA及構建hIL-18BP逆轉錄病毒載體,以研究IL-18BP與IL-18相互作用的機製及自身免疫性疾病的基因治療.方法從中國漢族人胎盤組織中提取總RNA,用RT-PCR方法擴增hIL-18BP cDNA,與載體pcDNA3連接,轉化大腸桿菌DH5α.得到的重組質粒經鑒定正確後,再作為模闆進行PCR.PCR產物插入逆轉錄病毒載體pLNCX中.結果 RT-PCR擴增齣全長585 bp的hIL-18BP cDNA,2次酶切鑒定證明hIL-18BP已分彆與pcDNA3、pLNCX重組.2次測序結果均與國外文獻報道的hIL-18BP的序列一緻.結論成功地剋隆瞭中國人IL-18BP cDNA,併構建瞭重組hIL-18BP逆轉錄病毒載體.
목적극륭인백세포개소-18결합단백(hIL-18BP)적cDNA급구건hIL-18BP역전록병독재체,이연구IL-18BP여IL-18상호작용적궤제급자신면역성질병적기인치료.방법종중국한족인태반조직중제취총RNA,용RT-PCR방법확증hIL-18BP cDNA,여재체pcDNA3련접,전화대장간균DH5α.득도적중조질립경감정정학후,재작위모판진행PCR.PCR산물삽입역전록병독재체pLNCX중.결과 RT-PCR확증출전장585 bp적hIL-18BP cDNA,2차매절감정증명hIL-18BP이분별여pcDNA3、pLNCX중조.2차측서결과균여국외문헌보도적hIL-18BP적서렬일치.결론성공지극륭료중국인IL-18BP cDNA,병구건료중조hIL-18BP역전록병독재체.
