微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2001年
2期
167-172
,共6页
刘相国%杨恭%邱并生%张克勤%田波
劉相國%楊恭%邱併生%張剋勤%田波
류상국%양공%구병생%장극근%전파
棉铃虫颗粒体病毒%增效蛋白%HaNPV%Bt%增效活性
棉鈴蟲顆粒體病毒%增效蛋白%HaNPV%Bt%增效活性
면령충과립체병독%증효단백%HaNPV%Bt%증효활성
将带有棉铃虫颗粒体病毒增效蛋白(HaGV enhancin)基因的重组表达载体pET-30a-En分别用Bal Ⅰ和Dra Ⅰ酶切后连接,构建重组表达载体pET-30a-Ben和pET-30a-Den,其外源基因的开放阅读框分别为HaGV增效蛋白基因5'端的1.7kb和2.2kb.IPTG诱导表达产生66.7kD和85.1kD的多肽并命名为Ben和Den.初步纯化的Ben和Den显示了对棉铃虫核多角体病毒(HaNPV)及Bt的增效活性.Ben可对棉铃虫核多角体病毒增效10.5%～26.5%,LT50缩短0.9d,Den增效10.2%～33.0%,LT50缩短1.2d～1.9d.重组增效蛋白可对Bt(1:2500稀释)增效20.7%～35.4%,Den增效16.7%～31.5%,Ben增效¨.7%～27.4%.这为进一步研制抗虫工程菌打下了良好的基础.
將帶有棉鈴蟲顆粒體病毒增效蛋白(HaGV enhancin)基因的重組錶達載體pET-30a-En分彆用Bal Ⅰ和Dra Ⅰ酶切後連接,構建重組錶達載體pET-30a-Ben和pET-30a-Den,其外源基因的開放閱讀框分彆為HaGV增效蛋白基因5'耑的1.7kb和2.2kb.IPTG誘導錶達產生66.7kD和85.1kD的多肽併命名為Ben和Den.初步純化的Ben和Den顯示瞭對棉鈴蟲覈多角體病毒(HaNPV)及Bt的增效活性.Ben可對棉鈴蟲覈多角體病毒增效10.5%～26.5%,LT50縮短0.9d,Den增效10.2%～33.0%,LT50縮短1.2d～1.9d.重組增效蛋白可對Bt(1:2500稀釋)增效20.7%～35.4%,Den增效16.7%～31.5%,Ben增效¨.7%～27.4%.這為進一步研製抗蟲工程菌打下瞭良好的基礎.
장대유면령충과립체병독증효단백(HaGV enhancin)기인적중조표체재체pET-30a-En분별용Bal Ⅰ화Dra Ⅰ매절후련접,구건중조표체재체pET-30a-Ben화pET-30a-Den,기외원기인적개방열독광분별위HaGV증효단백기인5'단적1.7kb화2.2kb.IPTG유도표체산생66.7kD화85.1kD적다태병명명위Ben화Den.초보순화적Ben화Den현시료대면령충핵다각체병독(HaNPV)급Bt적증효활성.Ben가대면령충핵다각체병독증효10.5%～26.5%,LT50축단0.9d,Den증효10.2%～33.0%,LT50축단1.2d～1.9d.중조증효단백가대Bt(1:2500희석)증효20.7%～35.4%,Den증효16.7%～31.5%,Ben증효¨.7%～27.4%.저위진일보연제항충공정균타하료량호적기출.
