生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2000年
2期
183-187
,共5页
脯氨酰内肽酶%高密度发酵%正交实验%条件优化
脯氨酰內肽酶%高密度髮酵%正交實驗%條件優化
포안선내태매%고밀도발효%정교실험%조건우화
基因工程菌 E.coli BL21/pGEM-PEP可以组成型表达重组的点状产气单胞菌脯氨酰内肽酶(PEP),但培养条件极大地影响着酶的产量,为了获得高效表达,首先测定了工程菌表达PEP的稳定性并考察了培养温度、pH、发酵时间、碳源、氮源、无机盐等对产酶的影响,得到了优化的发酵条件,L9(34)正交试验进一步明确了摇床转速、培养温度、pH值、培养时间对产酶量的影响都有高度的统计学意义.在此基础上利用NBS BioFlo 3000型5L自控发酵罐进行了高密度、高表达发酵、经20h培养,最终菌体密度达OD60060(相当于干菌体22.5g/L),PEP表达量为28%,每升发酵液中含PEP酶3.15g.
基因工程菌 E.coli BL21/pGEM-PEP可以組成型錶達重組的點狀產氣單胞菌脯氨酰內肽酶(PEP),但培養條件極大地影響著酶的產量,為瞭穫得高效錶達,首先測定瞭工程菌錶達PEP的穩定性併攷察瞭培養溫度、pH、髮酵時間、碳源、氮源、無機鹽等對產酶的影響,得到瞭優化的髮酵條件,L9(34)正交試驗進一步明確瞭搖床轉速、培養溫度、pH值、培養時間對產酶量的影響都有高度的統計學意義.在此基礎上利用NBS BioFlo 3000型5L自控髮酵罐進行瞭高密度、高錶達髮酵、經20h培養,最終菌體密度達OD60060(相噹于榦菌體22.5g/L),PEP錶達量為28%,每升髮酵液中含PEP酶3.15g.
기인공정균 E.coli BL21/pGEM-PEP가이조성형표체중조적점상산기단포균포안선내태매(PEP),단배양조건겁대지영향착매적산량,위료획득고효표체,수선측정료공정균표체PEP적은정성병고찰료배양온도、pH、발효시간、탄원、담원、무궤염등대산매적영향,득도료우화적발효조건,L9(34)정교시험진일보명학료요상전속、배양온도、pH치、배양시간대산매량적영향도유고도적통계학의의.재차기출상이용NBS BioFlo 3000형5L자공발효관진행료고밀도、고표체발효、경20h배양,최종균체밀도체OD60060(상당우간균체22.5g/L),PEP표체량위28%,매승발효액중함PEP매3.15g.
