CAJ | 학술논문

目的克隆与小鼠红细胞终末分化相关因子的基因,并对其表达特性进行分析.方法用致贫血Friend病毒(FVA)诱导BALB/c小鼠脾脏产生大量FVA原红细胞,后者经分离纯化并在促红细胞生成素作用下进行体外培养.采用减除杂交与PCR相结合的方法,用未经培养的FVA诱导的原红细胞(0 h FVA原红细胞)的cDNA对培养36 h的FVA诱导的成红细胞(36 h FVA成红细胞)的cDNA进行多次减除杂交和PCR扩增,构建上述36 h cDNA的质粒减除文库并进行差异筛选.对阳性克隆进行核苷酸序列测定及Northern印迹分析.结果获得1个472 bp的cDNA片段,其中含有1个309 bp的开放阅读框架,编码102个氨基酸.经GenBank进行同源比较,未发现同源序列,已被GenBank接受,(编号AA¨4369).Northern印迹分析表明,该cDNA在培养36 h的FVA中、晚幼红细胞中呈差异表达,其mRNA全长约为500～600bp左右.将其暂命名为小鼠红细胞分化相关因子(MEDRF)基因.结论 MEDRF基因在红细胞分化的中、晚幼阶段特异表达,表明MEDRF是一个新的与红细胞终末分化相关的因子.
목적극륭여소서홍세포종말분화상관인자적기인,병대기표체특성진행분석.방법용치빈혈Friend병독(FVA)유도BALB/c소서비장산생대량FVA원홍세포,후자경분리순화병재촉홍세포생성소작용하진행체외배양.채용감제잡교여PCR상결합적방법,용미경배양적FVA유도적원홍세포(0 h FVA원홍세포)적cDNA대배양36 h적FVA유도적성홍세포(36 h FVA성홍세포)적cDNA진행다차감제잡교화PCR확증,구건상술36 h cDNA적질립감제문고병진행차이사선.대양성극륭진행핵감산서렬측정급Northern인적분석.결과획득1개472 bp적cDNA편단,기중함유1개309 bp적개방열독광가,편마102개안기산.경GenBank진행동원비교,미발현동원서렬,이피GenBank접수,(편호AA¨4369).Northern인적분석표명,해cDNA재배양36 h적FVA중、만유홍세포중정차이표체,기mRNA전장약위500～600bp좌우.장기잠명명위소서홍세포분화상관인자(MEDRF)기인.결론 MEDRF기인재홍세포분화적중、만유계단특이표체,표명MEDRF시일개신적여홍세포종말분화상관적인자.