山西医科大学学报
山西醫科大學學報
산서의과대학학보
JOURNAL OF SHANXI MEDICAL UNIVERSITY
2002年
1期
1-2
,共2页
变形链球菌%表面蛋白质可变区%基因融合%基因表达
變形鏈毬菌%錶麵蛋白質可變區%基因融閤%基因錶達
변형련구균%표면단백질가변구%기인융합%기인표체
目的探讨变形链球菌表面蛋白可变区(V+)基因在大肠杆菌中高效诱导表达及其表达产物的进一步纯化.方法将V+基因以C端融合6个组氨酸的形式在E.coli BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达.His6融合表达产物经金属离子(Ni2+)配体亲和层析分离纯化,SDS-PAGE电泳和Western blot印迹分析表达产物.结果 SDS-PAGE分析确定有与His6融合表达产物(His6-rV+)理论相对分子质量一致的诱导表达条带,其表达量占全菌蛋白的20%左右,表达产物以可溶形式存在.进一步纯化目的蛋白,纯度可达90%.Western blot实验表明表达产物具有良好的抗原性.结论 His6融合表达载体可以高效地表达和纯化重组V+蛋白.
目的探討變形鏈毬菌錶麵蛋白可變區(V+)基因在大腸桿菌中高效誘導錶達及其錶達產物的進一步純化.方法將V+基因以C耑融閤6箇組氨痠的形式在E.coli BL21(DE3)中進行IPTG誘導錶達.His6融閤錶達產物經金屬離子(Ni2+)配體親和層析分離純化,SDS-PAGE電泳和Western blot印跡分析錶達產物.結果 SDS-PAGE分析確定有與His6融閤錶達產物(His6-rV+)理論相對分子質量一緻的誘導錶達條帶,其錶達量佔全菌蛋白的20%左右,錶達產物以可溶形式存在.進一步純化目的蛋白,純度可達90%.Western blot實驗錶明錶達產物具有良好的抗原性.結論 His6融閤錶達載體可以高效地錶達和純化重組V+蛋白.
목적탐토변형련구균표면단백가변구(V+)기인재대장간균중고효유도표체급기표체산물적진일보순화.방법장V+기인이C단융합6개조안산적형식재E.coli BL21(DE3)중진행IPTG유도표체.His6융합표체산물경금속리자(Ni2+)배체친화층석분리순화,SDS-PAGE전영화Western blot인적분석표체산물.결과 SDS-PAGE분석학정유여His6융합표체산물(His6-rV+)이론상대분자질량일치적유도표체조대,기표체량점전균단백적20%좌우,표체산물이가용형식존재.진일보순화목적단백,순도가체90%.Western blot실험표명표체산물구유량호적항원성.결론 His6융합표체재체가이고효지표체화순화중조V+단백.
