兰州大学学报(自然科学版)
蘭州大學學報(自然科學版)
란주대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF LANZHOU UNIVERSITY
2001年
5期
88-93
,共6页
孟延发%孟雪琴%杜毅峰%李绪渊
孟延髮%孟雪琴%杜毅峰%李緒淵
맹연발%맹설금%두의봉%리서연
熊猫豆%β-D-半乳糖苷酶%化学修饰
熊貓豆%β-D-半乳糖苷酶%化學脩飾
웅묘두%β-D-반유당감매%화학수식
经硫酸铵分级分离,DEAE-cellulose 52,CM-cellulose 52和Sephacryl S 100HR凝胶过滤层析方法从熊猫豆黄化苗中获得了一种β-D-半乳糖苷酶,活性收率为8.0%,纯化倍数为245.经PAGE显示单一蛋白着色带,用IEF-PAGE测定其PI为4.1.SDS-PAGE显示2条蛋白着色带,其相应分子量分别为40 kD和29 kD.Sephadex G200层析法测得表观分子量为68kD.以ONPG和PNPG为底物测得该酶的表观Km分别为3.02 mmol/L和0.33 mmol/L.最适pH为4.2,最适温度为52℃.以乳糖为底物测得表观Km为43 mmol/L.HgCI2,DTNB,NEMI,半乳糖和乳糖对酶表现出不同的抑制作用.对某些金属离子和化学修饰剂对酶活性的影响也进行了探讨.
經硫痠銨分級分離,DEAE-cellulose 52,CM-cellulose 52和Sephacryl S 100HR凝膠過濾層析方法從熊貓豆黃化苗中穫得瞭一種β-D-半乳糖苷酶,活性收率為8.0%,純化倍數為245.經PAGE顯示單一蛋白著色帶,用IEF-PAGE測定其PI為4.1.SDS-PAGE顯示2條蛋白著色帶,其相應分子量分彆為40 kD和29 kD.Sephadex G200層析法測得錶觀分子量為68kD.以ONPG和PNPG為底物測得該酶的錶觀Km分彆為3.02 mmol/L和0.33 mmol/L.最適pH為4.2,最適溫度為52℃.以乳糖為底物測得錶觀Km為43 mmol/L.HgCI2,DTNB,NEMI,半乳糖和乳糖對酶錶現齣不同的抑製作用.對某些金屬離子和化學脩飾劑對酶活性的影響也進行瞭探討.
경류산안분급분리,DEAE-cellulose 52,CM-cellulose 52화Sephacryl S 100HR응효과려층석방법종웅묘두황화묘중획득료일충β-D-반유당감매,활성수솔위8.0%,순화배수위245.경PAGE현시단일단백착색대,용IEF-PAGE측정기PI위4.1.SDS-PAGE현시2조단백착색대,기상응분자량분별위40 kD화29 kD.Sephadex G200층석법측득표관분자량위68kD.이ONPG화PNPG위저물측득해매적표관Km분별위3.02 mmol/L화0.33 mmol/L.최괄pH위4.2,최괄온도위52℃.이유당위저물측득표관Km위43 mmol/L.HgCI2,DTNB,NEMI,반유당화유당대매표현출불동적억제작용.대모사금속리자화화학수식제대매활성적영향야진행료탐토.
