免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2003年
4期
289-292
,共4页
人成纤维生长因子12%融合蛋白%纯化%促有丝分裂活性
人成纖維生長因子12%融閤蛋白%純化%促有絲分裂活性
인성섬유생장인자12%융합단백%순화%촉유사분렬활성
目的在原核表达系统中获得高效表达的人成纤维生长因子12融合蛋白.方法采用逆转录PCR方法获得hFGF12 cDNA , 将其连接到pET 28a原核表达载体,转化入BL21(DE3)菌中表达,经金属螯合亲和层析法和肝素亲和层析法纯化,以刺激NIH 3T3成纤维细胞增殖实验;测定纯化的hFGF12融合蛋白活性.结果表达产物经SDS-PAGE电泳,在Mr 31 000 附近新增一条明显区带,与预期的相对分子质量相符.重组融合蛋白能刺激NIH3T3细胞增殖.结论在大肠杆菌中表达了具有促有丝分裂活性的融合蛋白.
目的在原覈錶達繫統中穫得高效錶達的人成纖維生長因子12融閤蛋白.方法採用逆轉錄PCR方法穫得hFGF12 cDNA , 將其連接到pET 28a原覈錶達載體,轉化入BL21(DE3)菌中錶達,經金屬螯閤親和層析法和肝素親和層析法純化,以刺激NIH 3T3成纖維細胞增殖實驗;測定純化的hFGF12融閤蛋白活性.結果錶達產物經SDS-PAGE電泳,在Mr 31 000 附近新增一條明顯區帶,與預期的相對分子質量相符.重組融閤蛋白能刺激NIH3T3細胞增殖.結論在大腸桿菌中錶達瞭具有促有絲分裂活性的融閤蛋白.
목적재원핵표체계통중획득고효표체적인성섬유생장인자12융합단백.방법채용역전록PCR방법획득hFGF12 cDNA , 장기련접도pET 28a원핵표체재체,전화입BL21(DE3)균중표체,경금속오합친화층석법화간소친화층석법순화,이자격NIH 3T3성섬유세포증식실험;측정순화적hFGF12융합단백활성.결과표체산물경SDS-PAGE전영,재Mr 31 000 부근신증일조명현구대,여예기적상대분자질량상부.중조융합단백능자격NIH3T3세포증식.결론재대장간균중표체료구유촉유사분렬활성적융합단백.
