中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2005年
4期
589-595
,共7页
郭健欣%潘敬新%朱元贵%骆永河%郭熙哲%蔡俊峰%李永加%李秋兰
郭健訢%潘敬新%硃元貴%駱永河%郭熙哲%蔡俊峰%李永加%李鞦蘭
곽건흔%반경신%주원귀%락영하%곽희철%채준봉%리영가%리추란
反应性氧代谢物%硫普罗宁%二氢氯组胺%NK细胞%K562细胞
反應性氧代謝物%硫普囉寧%二氫氯組胺%NK細胞%K562細胞
반응성양대사물%류보라저%이경록조알%NK세포%K562세포
为了探讨新型反应性氧代谢物(reactive oxygen metabolites,ROM)清除剂在NK细胞抑制K562细胞时作为免疫佐剂的作用,采用IL-2及PHA活化单核(MO)细胞,使MO细胞的ROM产量增加,观察NK细胞活性和K562细胞抑制率(KIR)的相应变化,然后在不同比例的MO+NK+K562细胞培养体系中加入不同浓度的ROM清除剂(硫普罗宁),定期检测ROM产量及KIR(每种检测均做3个复孔),同时应用不同浓度的二氢氯组胺(DHT)作为阳性对照.结果表明:在K562细胞、NK细胞混合培养体系中,当E/T=10/1时,加入IL-2/PHA后ROM的产量从33.17±25.02 U/ml增至223.59±59.41 U/ml(P＜0.05),KIR从65.56%升至85.89%(P＜0.05);当按E/MO=10/2、10/5、10/10三种比例加入MO细胞后,ROM产量随着MO细胞数量的增加而增加(ROM产量分别为389.79±43.83 U/ml,456.74±42.77 U/ml,601.42±21.92 U/ml),而KIR则相反(KIR分别为82.36%,81.36%,48.09%);而在K562+NK+MO+IL-2/PHA混合培养体系中加入硫普罗宁、DHT后,当E/MO=10/2时,ROM产量从389.79±43.83 U/ml分别降至-1.20±60.70 U/ml和50.21±22.4 U/ml(P＜0.05),KIR则从82.53%分别升至96.09%和94.64%(P＜0.05).随着硫普罗宁、DHT浓度的增加,ROM产量逐渐减少.ROM产量与KIR呈负相关(r=-0.518).当E/MO为10/5或10/10时,各浓度硫普罗宁及高浓度的DHT可使ROM产量减少(P＜0.05),但KIR提高不明显(P＞0.05).硫普罗宁在提高KIR的效应方面与DHT相似(P＞0.05),而在清除ROM方面,硫普罗宁较DHT为优(P＜0.05).结论:①MO细胞是ROM产生的最主要来源,其产生的ROM可使NK细胞的抗瘤(抗K562)活性下降;②新型ROM清除剂(硫普罗宁)可有效清除ROM,在一定程度上逆转ROM对NK细胞抗K562细胞的抑制作用,且在逆转ROM方面优于DHT,在提高NK细胞对K562细胞的抑制率方面效应强度与DHT相似,但毒副作用较低,有望替代DHT作为免疫佐剂用于白血病的过继性免疫治疗中.
為瞭探討新型反應性氧代謝物(reactive oxygen metabolites,ROM)清除劑在NK細胞抑製K562細胞時作為免疫佐劑的作用,採用IL-2及PHA活化單覈(MO)細胞,使MO細胞的ROM產量增加,觀察NK細胞活性和K562細胞抑製率(KIR)的相應變化,然後在不同比例的MO+NK+K562細胞培養體繫中加入不同濃度的ROM清除劑(硫普囉寧),定期檢測ROM產量及KIR(每種檢測均做3箇複孔),同時應用不同濃度的二氫氯組胺(DHT)作為暘性對照.結果錶明:在K562細胞、NK細胞混閤培養體繫中,噹E/T=10/1時,加入IL-2/PHA後ROM的產量從33.17±25.02 U/ml增至223.59±59.41 U/ml(P＜0.05),KIR從65.56%升至85.89%(P＜0.05);噹按E/MO=10/2、10/5、10/10三種比例加入MO細胞後,ROM產量隨著MO細胞數量的增加而增加(ROM產量分彆為389.79±43.83 U/ml,456.74±42.77 U/ml,601.42±21.92 U/ml),而KIR則相反(KIR分彆為82.36%,81.36%,48.09%);而在K562+NK+MO+IL-2/PHA混閤培養體繫中加入硫普囉寧、DHT後,噹E/MO=10/2時,ROM產量從389.79±43.83 U/ml分彆降至-1.20±60.70 U/ml和50.21±22.4 U/ml(P＜0.05),KIR則從82.53%分彆升至96.09%和94.64%(P＜0.05).隨著硫普囉寧、DHT濃度的增加,ROM產量逐漸減少.ROM產量與KIR呈負相關(r=-0.518).噹E/MO為10/5或10/10時,各濃度硫普囉寧及高濃度的DHT可使ROM產量減少(P＜0.05),但KIR提高不明顯(P＞0.05).硫普囉寧在提高KIR的效應方麵與DHT相似(P＞0.05),而在清除ROM方麵,硫普囉寧較DHT為優(P＜0.05).結論:①MO細胞是ROM產生的最主要來源,其產生的ROM可使NK細胞的抗瘤(抗K562)活性下降;②新型ROM清除劑(硫普囉寧)可有效清除ROM,在一定程度上逆轉ROM對NK細胞抗K562細胞的抑製作用,且在逆轉ROM方麵優于DHT,在提高NK細胞對K562細胞的抑製率方麵效應彊度與DHT相似,但毒副作用較低,有望替代DHT作為免疫佐劑用于白血病的過繼性免疫治療中.
위료탐토신형반응성양대사물(reactive oxygen metabolites,ROM)청제제재NK세포억제K562세포시작위면역좌제적작용,채용IL-2급PHA활화단핵(MO)세포,사MO세포적ROM산량증가,관찰NK세포활성화K562세포억제솔(KIR)적상응변화,연후재불동비례적MO+NK+K562세포배양체계중가입불동농도적ROM청제제(류보라저),정기검측ROM산량급KIR(매충검측균주3개복공),동시응용불동농도적이경록조알(DHT)작위양성대조.결과표명:재K562세포、NK세포혼합배양체계중,당E/T=10/1시,가입IL-2/PHA후ROM적산량종33.17±25.02 U/ml증지223.59±59.41 U/ml(P＜0.05),KIR종65.56%승지85.89%(P＜0.05);당안E/MO=10/2、10/5、10/10삼충비례가입MO세포후,ROM산량수착MO세포수량적증가이증가(ROM산량분별위389.79±43.83 U/ml,456.74±42.77 U/ml,601.42±21.92 U/ml),이KIR칙상반(KIR분별위82.36%,81.36%,48.09%);이재K562+NK+MO+IL-2/PHA혼합배양체계중가입류보라저、DHT후,당E/MO=10/2시,ROM산량종389.79±43.83 U/ml분별강지-1.20±60.70 U/ml화50.21±22.4 U/ml(P＜0.05),KIR칙종82.53%분별승지96.09%화94.64%(P＜0.05).수착류보라저、DHT농도적증가,ROM산량축점감소.ROM산량여KIR정부상관(r=-0.518).당E/MO위10/5혹10/10시,각농도류보라저급고농도적DHT가사ROM산량감소(P＜0.05),단KIR제고불명현(P＞0.05).류보라저재제고KIR적효응방면여DHT상사(P＞0.05),이재청제ROM방면,류보라저교DHT위우(P＜0.05).결론:①MO세포시ROM산생적최주요래원,기산생적ROM가사NK세포적항류(항K562)활성하강;②신형ROM청제제(류보라저)가유효청제ROM,재일정정도상역전ROM대NK세포항K562세포적억제작용,차재역전ROM방면우우DHT,재제고NK세포대K562세포적억제솔방면효응강도여DHT상사,단독부작용교저,유망체대DHT작위면역좌제용우백혈병적과계성면역치료중.
