CAJ | 학술논문

目的:观察体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化前后某些离子通道mRNA表达的变化,以进一步探讨离子通道在骨髓间充质干细胞增殖和向心肌细胞分化中的作用.方法:实验于2004-12/2005-07在哈尔滨医科大学病理生理学实验室和组织与胚胎学实验室完成.实验选用Wistar大鼠,雌雄不限,体质量100～120 g.分离、培养和纯化大鼠骨髓间充质干细胞,以DAPI(5 mg/L)标记第三代的骨髓间充质干细胞后,采用10 μmol/L 5-氮胞苷诱导,于诱导后第4周做细胞免疫荧光化学检测细胞肌钙蛋白的表达.采用反转录聚合酶链反应技术检测诱导分化前后钙通道的αlc,α1D,α1G,α1H,α1S亚基;钾通道:ERG,IK1,KvLQT1和钠通道SCN5A mRNA的表达结果:①5-氮胞苷诱导后第4周细胞可见心肌细胞特异性肌钙蛋白的表达.②反转录聚合酶链反应结果显示分化后的细胞表达L-型钙通道的α1c,α1D,T-型钙通道的1G亚基和钾通道:ERG-1,Kir2.1,KvLQT-1和钠通道SCN5A mRNA的表达,与成熟心肌细胞相似.③在诱导分化前的骨髓间充质干细胞也发现了L-型钙通道的α1c亚基,ERG-1和KvLQT-1钾通道的表达.结论:骨髓间充质于细胞可被诱导分化为心肌样细胞,分化后的细胞表达形成动作电位的相关离子通道基因,进一步表明骨髓间充质干细胞可作为心肌细胞移植的种子细胞.实验观察到未分化的骨髓间充质干细胞也有L-型钙通道,ERG-1和KvLQT1钾通道的表达,推测这些离子通道可能在骨髓间充质干细胞的增殖和向心肌细胞分化中具有重要的作用.
목적:관찰체외유도골수간충질간세포향심기세포분화전후모사리자통도mRNA표체적변화,이진일보탐토리자통도재골수간충질간세포증식화향심기세포분화중적작용.방법:실험우2004-12/2005-07재합이빈의과대학병리생이학실험실화조직여배태학실험실완성.실험선용Wistar대서,자웅불한,체질량100～120 g.분리、배양화순화대서골수간충질간세포,이DAPI(5 mg/L)표기제삼대적골수간충질간세포후,채용10 μmol/L 5-담포감유도,우유도후제4주주세포면역형광화학검측세포기개단백적표체.채용반전록취합매련반응기술검측유도분화전후개통도적αlc,α1D,α1G,α1H,α1S아기;갑통도:ERG,IK1,KvLQT1화납통도SCN5A mRNA적표체결과:①5-담포감유도후제4주세포가견심기세포특이성기개단백적표체.②반전록취합매련반응결과현시분화후적세포표체L-형개통도적α1c,α1D,T-형개통도적1G아기화갑통도:ERG-1,Kir2.1,KvLQT-1화납통도SCN5A mRNA적표체,여성숙심기세포상사.③재유도분화전적골수간충질간세포야발현료L-형개통도적α1c아기,ERG-1화KvLQT-1갑통도적표체.결론:골수간충질우세포가피유도분화위심기양세포,분화후적세포표체형성동작전위적상관리자통도기인,진일보표명골수간충질간세포가작위심기세포이식적충자세포.실험관찰도미분화적골수간충질간세포야유L-형개통도,ERG-1화KvLQT1갑통도적표체,추측저사리자통도가능재골수간충질간세포적증식화향심기세포분화중구유중요적작용.