生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2008年
2期
179-183
,共5页
吴传湘%刘国珍%李涛%谭德明%刘洪波
吳傳湘%劉國珍%李濤%譚德明%劉洪波
오전상%류국진%리도%담덕명%류홍파
乙肝病毒%X蛋白%转化%人肝细胞
乙肝病毒%X蛋白%轉化%人肝細胞
을간병독%X단백%전화%인간세포
选取已稳定转染HBV X基因的QSG7701细胞(pCMVX/QSG7701),并以稳定转染空质粒pRc/CMV2的QSG7701细胞(pRcCMV2/QSG7701)及未转染的QSG7701细胞为对照,用免疫荧光方法检测pCMV X/QSG7701细胞中HBX蛋白的分布;用RT-PCR方法和免疫细胞化学法分别检测细胞中c-Myc表达:用光镜及电镜观察细胞形态学变化,进一步研究乙肝病毒(HBV) X基因对永生化非瘤性人肝细胞QSG7701的转化作用.研究发现,乙肝病毒X(HBX)蛋白主要分布在细胞膜及细胞浆;c-Myc mRNA及c-Myc蛋白在3种细胞中均有表达,但转染了X基因的细胞中c-Myc的表达水平较其他两组明显升高(p<0.Ol);光镜和电镜下观察发现pCMV X/QSG细胞的胞核较大,核膜增厚,核仁肥大且增多,核/浆比例失调.可见少量多核巨细胞,pRc-CMV2/QSG7701细胞与QSG7701细胞核浆比正常,染色质分布均匀,胞核大小及形态正常.结果表明.HBVX基因成功转染了QSG7701细胞,HBV X蛋白主要分布于转染细胞的细胞膜和细胞浆中.HBX可能通过上调转染细胞中c-Myc蛋白的表达而使细胞具备恶性化生长的倾向.
選取已穩定轉染HBV X基因的QSG7701細胞(pCMVX/QSG7701),併以穩定轉染空質粒pRc/CMV2的QSG7701細胞(pRcCMV2/QSG7701)及未轉染的QSG7701細胞為對照,用免疫熒光方法檢測pCMV X/QSG7701細胞中HBX蛋白的分佈;用RT-PCR方法和免疫細胞化學法分彆檢測細胞中c-Myc錶達:用光鏡及電鏡觀察細胞形態學變化,進一步研究乙肝病毒(HBV) X基因對永生化非瘤性人肝細胞QSG7701的轉化作用.研究髮現,乙肝病毒X(HBX)蛋白主要分佈在細胞膜及細胞漿;c-Myc mRNA及c-Myc蛋白在3種細胞中均有錶達,但轉染瞭X基因的細胞中c-Myc的錶達水平較其他兩組明顯升高(p<0.Ol);光鏡和電鏡下觀察髮現pCMV X/QSG細胞的胞覈較大,覈膜增厚,覈仁肥大且增多,覈/漿比例失調.可見少量多覈巨細胞,pRc-CMV2/QSG7701細胞與QSG7701細胞覈漿比正常,染色質分佈均勻,胞覈大小及形態正常.結果錶明.HBVX基因成功轉染瞭QSG7701細胞,HBV X蛋白主要分佈于轉染細胞的細胞膜和細胞漿中.HBX可能通過上調轉染細胞中c-Myc蛋白的錶達而使細胞具備噁性化生長的傾嚮.
선취이은정전염HBV X기인적QSG7701세포(pCMVX/QSG7701),병이은정전염공질립pRc/CMV2적QSG7701세포(pRcCMV2/QSG7701)급미전염적QSG7701세포위대조,용면역형광방법검측pCMV X/QSG7701세포중HBX단백적분포;용RT-PCR방법화면역세포화학법분별검측세포중c-Myc표체:용광경급전경관찰세포형태학변화,진일보연구을간병독(HBV) X기인대영생화비류성인간세포QSG7701적전화작용.연구발현,을간병독X(HBX)단백주요분포재세포막급세포장;c-Myc mRNA급c-Myc단백재3충세포중균유표체,단전염료X기인적세포중c-Myc적표체수평교기타량조명현승고(p<0.Ol);광경화전경하관찰발현pCMV X/QSG세포적포핵교대,핵막증후,핵인비대차증다,핵/장비례실조.가견소량다핵거세포,pRc-CMV2/QSG7701세포여QSG7701세포핵장비정상,염색질분포균균,포핵대소급형태정상.결과표명.HBVX기인성공전염료QSG7701세포,HBV X단백주요분포우전염세포적세포막화세포장중.HBX가능통과상조전염세포중c-Myc단백적표체이사세포구비악성화생장적경향.
