CAJ | 학술논문

目的:探讨ICAP1α及突变体T38A、I138A在内皮细胞ECV304内化整合素β1中的作用和机制.方法:构建pAAV-ICAP1α及其突变体pAAV-T38A和pAAV-I138A真核表达载体,转染ECV304.ECV304分为ICAP1α组、T38A组、I138A组、绿色荧光蛋白(GFP)组和未转染组,用NHS-SS-Biotin标记整合素β1,并利用生物素-亲和素系统以及Western blot检测整合素β1内化情况.结果:各组细胞转染的质粒均稳定表达;Western blot检测ICAP1α组,T38A组、I138A组、GFP组、未转染组内化的整合素β1相对光密度值分别为1.07±0.04、0.68±0.06、0.70±0.02、0.87±0.06、0.88±0.04;与GFP组和未转染组比较,ICAP1α组整合素β1内化明显增多(P<0.05);与GFP组、未转染组和ICAP1α组比较,T38A组和I138A组整合素β1内化明显减少(P<0.05),GFP组与未转染组无差别(P＞0.05).结论:转染ICAP1α后内皮细胞ECV304表面整合素β1内化增加,而转染T38A和I138A后内皮细胞ECV304表面整合素β1内化减少;ICAP1α可能通过第38位的苏氨酸残基(38Tyr)和第138位的异亮氨酸残基(138Ile)调控整合素β1的内化.
목적:탐토ICAP1α급돌변체T38A、I138A재내피세포ECV304내화정합소β1중적작용화궤제.방법:구건pAAV-ICAP1α급기돌변체pAAV-T38A화pAAV-I138A진핵표체재체,전염ECV304.ECV304분위ICAP1α조、T38A조、I138A조、록색형광단백(GFP)조화미전염조,용NHS-SS-Biotin표기정합소β1,병이용생물소-친화소계통이급Western blot검측정합소β1내화정황.결과:각조세포전염적질립균은정표체;Western blot검측ICAP1α조,T38A조、I138A조、GFP조、미전염조내화적정합소β1상대광밀도치분별위1.07±0.04、0.68±0.06、0.70±0.02、0.87±0.06、0.88±0.04;여GFP조화미전염조비교,ICAP1α조정합소β1내화명현증다(P<0.05);여GFP조、미전염조화ICAP1α조비교,T38A조화I138A조정합소β1내화명현감소(P<0.05),GFP조여미전염조무차별(P＞0.05).결론:전염ICAP1α후내피세포ECV304표면정합소β1내화증가,이전염T38A화I138A후내피세포ECV304표면정합소β1내화감소;ICAP1α가능통과제38위적소안산잔기(38Tyr)화제138위적이량안산잔기(138Ile)조공정합소β1적내화.