CAJ | 학술논문

目的: 建立检测人白介素-9 (interleukin-9,IL-9) mRNA的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR( real-time fluorescence quantitative PCR, qRT-PCR)方法.方法: 分离人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC),经PMA和离子霉素刺激活化后提取总RNA并逆转录成cDNA.扩增产物与pMD-18T载体连接构建质粒标准品.采用qRT-PCR方法检测IL-9 mRNA的表达水平.评价该方法的线性及特异性,应用该方法检测Graves病患者PBMC中IL-9 mRNA 表达水平.结果: 建立了人IL-9的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法.该法的标准曲线相关系数r2为0.995~0.998,熔解曲线分析产物为单峰.Graves病患者PBMC中IL-9 mRNA的相对表达水平明显高于健康对照组(P0.01).结论:建立的检测人IL-9 mRNA的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法灵敏、特异性好,为进一步临床应用提供了实验基础.
목적: 건립검측인백개소-9 (interleukin-9,IL-9) mRNA적SYBR GreenⅠ실시형광정량PCR( real-time fluorescence quantitative PCR, qRT-PCR)방법.방법: 분리인외주혈단개핵세포(peripheral blood mononuclear cells, PBMC),경PMA화리자매소자격활화후제취총RNA병역전록성cDNA.확증산물여pMD-18T재체련접구건질립표준품.채용qRT-PCR방법검측IL-9 mRNA적표체수평.평개해방법적선성급특이성,응용해방법검측Graves병환자PBMC중IL-9 mRNA 표체수평.결과: 건립료인IL-9적SYBR GreenⅠ실시형광정량PCR검측방법.해법적표준곡선상관계수r2위0.995~0.998,용해곡선분석산물위단봉.Graves병환자PBMC중IL-9 mRNA적상대표체수평명현고우건강대조조(P0.01).결론:건립적검측인IL-9 mRNA적SYBR GreenⅠ실시형광정량PCR방법령민、특이성호,위진일보림상응용제공료실험기출.